一、基本信息

产品名称：NotI-HF®限制性内切酶

产品货号：R3189S / R3189L / R3189M

规格：500 units / 2,500 units / 2,500units（100,000 units/ml）

保存温度：-20°C

二、产品介绍

NotI-HF®是一种高保真限制性内切酶，通过基因工程改造自Nocardia otitidis-caviarum来源的NotI基因。该产品经过优化，在保持与原始酶相同切割特异性（识别位点5‘-GCGGCCGC-3’）的同时，显著降低了星号活性，并可在单一rCutSmart™缓冲液中实现100%酶切活性，简化了实验流程。

三、产品应用

NotI-HF®适用于多种分子生物学实验。

△快速克隆：用于质粒构建等克隆工作流程中的DNA切割。

△限制性酶切：用于DNA样品的特异性消化与分析。

四、产品优势

✅高保真度：经过工程化改造，显著降低非特异性切割（星号活性），确保结果准确。

✅高效活性：在推荐的rCutSmart™缓冲液中可发挥100%酶切活性，反应高效。

✅快速便捷：符合Time-Saver™标准，可在5-15分钟内完成消化，也支持过夜反应。

✅即用便利：产品随附rCutSmart™缓冲液和紫色6X凝胶上样染料，方便直接使用。

✅条件宽泛：在更广泛的反应条件下保持完全活性，为实验设计提供灵活性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 体系配置：在冰上于无菌离心管中依次加入DNA、去离子水、10X rCutSmart™缓冲液及NotI-HF®酶。

2. 孵育反应：将反应体系混匀后，置于37°C恒温设备（如水浴锅或金属浴）中进行孵育。

3. 终止反应：反应结束后，可将反应体系置于65°C孵育20分钟以热失活酶，或直接加入上样染料进行电泳分析。

六、注意事项

1. 储存条件：酶制剂及缓冲液需保存于-20°C，避免反复冻融以维持酶活性稳定。

2. 反应体系：建议使用推荐的反应缓冲液及体积，以确保最佳酶切效率。

3. 甲基化影响：该酶对dam和dcm甲基化不敏感，但CpG甲基化会完全阻断其切割活性。

4. 质量控制：产品经过严格的无核酸酶污染检测，但仍建议使用无核酸酶的水和耗材进行操作。

七、相关产品推荐

1. NotI限制性内切酶（货号：R0189S）

2. rCutSmart™缓冲液（货号：B6004S）

3. 紫色6X凝胶上样染料（货号：B7024A）

4. 无核酸酶水（货号：B1500S）