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NEB AvrII 限制性内切酶

货号:R0174S / R0174L

AvrII 限制性内切酶是一种高效的分子克隆实验工具,用于DNA的特异性切割。该酶识别5‘-CCTAGG-3’序列,产生5‘端CTAG粘性末端,适用于快速克隆和图谱分析。具有Time-Saver™认证的快速消化反应,与rCutSmart™缓冲液的兼容性,以及附带的紫色6X凝胶上样染料,使得实验流程更加便捷。

一、基本信息

产品名称:AvrII 限制性内切酶

产品货号:R0174S / R0174L

规格:100 units / 500 units,酶浓度为5,000 units/ml。

保存温度:-20°C保存。

二、产品介绍

AvrII是一种从鱼腥藻(Anabaena variabilis UW)中克隆的限制性内切酶,由携带该基因的重组大肠杆菌表达生产。该产品经过重新配方,添加了重组白蛋白(rAlbumin),旨在提高酶的稳定性。它能够识别并切割5‘-CCTAGG-3’序列,产生5‘端CTAG粘性末端。

三、产品应用

AvrII限制性内切酶适用于多种分子克隆实验:

快速克隆:适用于需要快速酶切反应的克隆流程。

限制性酶切:用于DNA样品的特异性切割与图谱分析。

四、产品优势

快速高效:经Time-Saver™认证,可在5-15分钟内完成消化反应。

缓冲液兼容性:在rCutSmart™缓冲液中具有100%活性,该通用缓冲液支持超过210种酶,极大简化了双酶切实验设计。

配套齐全:产品附带一管紫色6X凝胶上样染料,方便后续电泳分析。

末端兼容性:切割产生5‘-CTAG突出末端,可与NheI、SpeI或XbaI酶切产生的片段进行高效连接。

五、使用说明(实验流程概要)

1. 体系配制:在冰上配制反应体系,确保包含1X rCutSmart™缓冲液、适量DNA底物及AvrII酶。

2. 温育消化:将反应体系置于37°C恒温设备中进行孵育。

3. 反应终止:该酶无法通过热失活灭活,反应结束后需通过柱纯化、凝胶回收或酚/氯仿抽提等方法纯化DNA产物。

4. 电泳分析:可加入提供的6X紫色上样染料,进行琼脂糖凝胶电泳以验证酶切效果。

六、注意事项

1. 储存条件:酶及配套缓冲液需长期保存于-20°C,上样染料可于25°C保存。

2. 失活方法:请注意AvrII无法通过加热失活,需采用物理分离方法(如柱纯化或凝胶回收)以去除或灭活酶。

3. 甲基化影响:其酶切活性不受dam、dcm或CpG甲基化的影响。

4. 同裂酶:AspA2I和XmaJI为AvrII的同裂酶,识别相同序列。

七、相关产品推荐

1. rCutSmart™缓冲液(货号:B6004S)

2. 紫色凝胶上样染料,6X(货号:B7024S)


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NEB AvrII 限制性内切酶
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