一、基本信息
产品名称:M13mp18单链DNA
产品货号:N4040S
规格:10 µg,浓度为 250 µg/mL
保存温度:-20°C
二、产品介绍
本产品为从M13mp18噬菌体中分离纯化的单链环状病毒DNA。M13mp18是一种M13 lac噬菌体载体,其β-半乳糖苷酶基因内包含多个单一限制性酶切位点。该DNA经过验证,可作为双脱氧链终止法(Sanger法)DNA测序的模板,也常用作分子生物学实验中的标准品。
三、产品应用
M13mp18单链DNA主要作为模板应用于分子克隆与测序相关实验。
△DNA测序:作为经典双脱氧链终止法(Sanger法)测序的专用单链DNA模板。
△标准品对照:在分子生物学实验中,作为单链DNA标准品,用于方法学建立或质量控制。
△体外诱变:作为单链模板,用于基于寡核苷酸的定点诱变等实验。
四、产品优势
✅高纯度:通过聚乙二醇沉淀法纯化噬菌体,并经苯酚抽提获得,DNA纯度满足高标准实验需求。
✅已验证:产品已通过功能测试,确认其在双脱氧链终止法测序中作为模板的有效性。
✅多克隆位点:载体在lacZ基因内包含HindIII、EcoRI等多个单一酶切位点,便于克隆操作与蓝白斑筛选。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 解冻与稀释:将产品从-20°C取出,置于冰上缓慢解冻,根据实验所需浓度用无菌水或TE缓冲液进行稀释。
2. 退火:在测序反应前,将适量单链DNA模板与测序引物混合,通过加热后缓慢冷却完成引物与模板的退火。
3. 测序反应:将退火后的模板-引物复合物加入测序反应体系,按照双脱氧链终止标准流程进行延伸与终止反应。
4. 产物分析:反应完成后,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳或毛细管电泳对测序产物进行分析。
六、注意事项
1. 储存条件:产品需长期保存于-20°C,避免反复冻融以维持DNA完整性。
2. 模板形式:本产品为单链环状DNA,一般不被限制性内切酶切割。如需酶切操作,请选用其双链复制形式(RF DNA)。
3. 使用缓冲液:产品溶于10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA (pH 8.0)缓冲液中,使用前请确认兼容性。
4. 无菌操作:为避免DNA酶污染,所有操作应在无菌条件下进行,并使用无核酸酶污染的试剂与耗材。
七、相关产品推荐
1. M13mp18 RF I DNA(货号:N4018S)