一、基本信息

产品名称：RetroNectin-C（重组人纤连蛋白片段）

产品货号：T100AC / T100BC

规格：0.5mg / 2.5mg

保存温度：-20℃

二、产品介绍

RetroNectin是一种重组人纤连蛋白功能片段（rFN-CH-296），包含细胞结合域、肝素结合域和CS-1序列。该产品通过促进逆转录病毒颗粒与表达VLA-4和/或VLA-5整合素受体的靶细胞共定位，从而显著提高逆转录病毒介导的基因转导效率，是细胞与基因治疗（CGT）研究中的关键辅助试剂。

三、产品应用

RetroNectin主要用于增强逆转录病毒对特定靶细胞的基因转导效率，其核心应用包括：

△逆转录病毒转导：提高对造血干细胞、T细胞等原代细胞的基因转导效率。

△慢病毒转导：作为辅助基质，增强慢病毒对难转导细胞的感染。

△CAR-T细胞制备：在嵌合抗原受体T细胞生产流程中，用于提高病毒对T细胞的转导效率。

△干细胞研究：在造血干细胞或间充质干细胞的基因修饰实验中，用于优化转导条件。

四、产品优势

✅高效转导：通过空间共定位机制，显著提高病毒对靶细胞的感染效率。

✅功能明确：包含完整的细胞与病毒结合域，作用机制清晰。

✅稳定性好：作为重组蛋白，批次间一致性好，可耐受多次冻融。

✅操作灵活：提供RBV和SN两种感染方法，适应不同实验需求。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 包被：用无菌PBS将RetroNectin稀释至20-100 μg/ml，加入培养板中，室温孵育2小时或4℃过夜。

2. 封闭：移除包被液，加入2% BSA/PBS溶液进行封闭，室温静置30分钟。

3. 洗涤：移除封闭液，使用HBSS/Hepes或PBS洗涤板孔一次。

4. 病毒结合（RBV法）：将病毒上清加入包被板，通过孵育或离心使其与RetroNectin结合，随后移除上清并洗涤。

5. 细胞接种：将计数后的靶细胞重悬，以推荐密度接种至处理过的板孔中。

6. 培养转导：将细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养2-3天。

7. 细胞收集：分别收集上清中的非贴壁细胞和经解离的贴壁细胞，合并后离心洗涤，以备后续分析。

六、注意事项

1. 储存：溶液需保存于-20℃，避免反复冻融超过10次。

2. 操作：稀释与分装时动作轻柔，避免涡旋振荡或剧烈混匀，以防蛋白变性。

3. 板材：需使用未经组织培养处理的培养板或培养皿进行包被。

4. 干燥：在病毒结合与细胞接种步骤中，需确保板孔表面始终湿润，避免干燥。

5. 无菌：所有操作应在无菌环境下进行，使用无菌试剂与耗材。

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