一、基本信息

产品编号：R1059

核心特点：高灵敏度、高纯度、高效回收、操作简便

产品描述：Zymo Research Quick-cfRNA™ Serum & Plasma Kit是一款专门用于从血清、血浆等生物体液中高效纯化高质量游离RNA（cfRNA）的试剂盒。该试剂盒采用创新的结合系统，无需使用苯酚-氯仿等有毒试剂，能有效回收包括微小RNA（miRNA）、外泌体RNA及蛋白结合RNA在内的总cfRNA，回收率相较于同类产品有显著提升，纯化后的RNA可直接用于RT-qPCR、下一代测序等高灵敏度下游应用。

二、产品应用

Zymo Research Quick-cfRNA™ Serum & Plasma Kit适用于从多种生物体液中提取游离RNA，用于后续分子生物学分析。

△液体活检研究：从血浆、血清中提取cfRNA，用于肿瘤、产前诊断等疾病标志物研究。

△外泌体及囊泡RNA分析：高效回收外泌体及其他细胞外囊泡中的RNA。

△微小RNA（miRNA）谱分析：特别优化用于高效回收低丰度miRNA。

△多类型生物样本处理：适用于脑脊液、羊水、尿液等多种体液样本的cfRNA提取。

三、产品优势

✅高回收率：采用专利结合技术，对微小RNA的回收效率可比肩同类产品提升高达515倍。

✅高纯度：纯化的cfRNA无抑制剂残留，纯度满足RT-qPCR、NGS等高灵敏度下游应用要求。

✅操作便捷：无需苯酚-氯仿抽提或繁琐的蛋白沉淀步骤，简化实验流程。

✅线性可扩展：cfRNA回收量与样本上样量（最高至3 mL）呈线性关系，适合低丰度靶标富集。

✅广泛兼容性：与Streck采血管兼容，并支持从DNA/RNA Shield等保存液中直接处理样本。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样本预处理：将样本于≥12,000 ×g离心15分钟，以去除细胞碎片和沉淀。

2. 样本消化：按比例向样本中加入Digestion Buffer和Proteinase K，涡旋混匀后于37°C孵育2小时。

3. 结合体系制备：向消化后的样本中加入等体积Binding Buffer和1.5倍体积异丙醇，充分混匀。

4. 真空过滤：将混合液转移至装有Spin-Away™ Filter的真空装置，抽滤使液体完全通过滤器。

5. 滤器清洗：向滤器中加入RNA Prep Buffer，继续抽滤以清洗。

6. 滤膜干燥：将滤器转移至收集管，离心2分钟以去除残留液体。

7. RNA洗脱与转移：向滤器加入RNA Recovery Buffer，孵育后离心收集穿透液，此穿透液含RNA。

8. RNA纯化：向穿透液中加入乙醇，混匀后转移至Zymo-Spin™ IC柱中离心结合。

9. 柱清洗：依次使用RNA Prep Buffer和RNA Wash Buffer清洗柱子，彻底去除杂质。

10. RNA洗脱：向柱基质中加入DNase/RNase-Free水，孵育后离心洗脱得到高纯度cfRNA。

五、注意事项

1. 样本处理：建议尽量减少样本冻融循环，解冻时推荐室温或37°C以避免难消化沉淀形成，处理前需高速离心去除沉淀。

2. 试剂配制：使用前需用指定缓冲液复溶Proteinase K，并向RNA Wash Buffer浓缩液中按比例加入乙醇。

3. 设备要求：实验需配备微型离心机、涡旋振荡器、37°C水浴或加热块、真空泵及真空歧管装置。

4. 产量与定量：cfRNA产量因样本而异，典型回收范围为1–100 ng/mL；建议使用荧光定量法（如Qubit）等高灵敏度方法对洗脱液进行准确定量。

5. 过程控制：若需在miRNA RT-qPCR分析中进行样本间变异控制，可在样本消化完成后加入1-10 pg外源性miRNA（如cel-miR-39-3p）作为 spike-in 对照。

6. 大体积处理：试剂盒标准配置支持1 mL样本处理，处理高达3 mL样本时，请参考附录C调整试剂用量。

六、相关产品推荐

1. DNase I Set（货号：E1010）：用于对纯化后的cfRNA洗脱液进行DNase消化，以彻底去除残留的基因组DNA污染。

2. Oligo Clean & Concentrator™（货号：D4060/D4061）：用于对经DNase处理后的RNA样本进行纯化与浓缩，以去除酶、盐离子等杂质。