一、基本信息
产品编号:R2070T/R2070/R2071/R2072/R2073
核心特点:柱式一步法/免氯仿/含DNase I/小RNA完整回收
产品描述: Zymo Research Direct-zol RNA Miniprep Plus为柱式总RNA提取试剂盒,可直接从TRIzol®或同类酸-硫氰酸胍-酚裂解试剂中纯化高达100 µg总RNA(含17 nt以上小RNA),无需相分离及沉淀步骤,内置DNase I膜上消化,7 min完成纯化,产物可直接用于NGS、RT-qPCR等高灵敏下游应用。
二、产品应用
Zymo Research Direct-zol RNA Miniprep Plus适用于多种样本类型的高质量RNA快速提取。
△动物组织:脾、肝、脑、心、肌肉等
△培养细胞:贴壁或悬浮细胞系
△微生物:革兰氏阴性/阳性菌、酵母
△体液:全血、血浆、唾液、脑脊液
△保存样本:DNA/RNA Shield™、RNAlater™稳定液处理样本
△体外转录产物:IVT RNA快速纯化
三、产品优势
✅一步法:裂解液直接加乙醇后上柱,省略氯仿抽提与相分离。
✅高回收:Zymo-Spin™ IIICG柱结合能力≥100 µg,17-200 nt小RNA无丢失。
✅无gDNA:柱上DNase I消化步骤已整合,确保下游无基因组干扰。
✅快速:全程室温操作,7 min获得高纯度RNA(A260/280 & A260/230 >1.8)。
✅兼容广:适配TRIzol®、TRI Reagent®及市售同类试剂,样本类型覆盖动植物、微生物及体液。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 缓冲液配制:向PreWash与Wash Buffer加入标示体积乙醇,DNase I用无核酸酶水复溶。
2. 样本裂解:组织或细胞用≥800 µl TRI Reagent®匀浆,离心去碎片取上清。
3. 乙醇结合:裂解液加等体积95-100%乙醇混匀。
4. 柱结合:全部混合液转入Zymo-Spin™ IIICG柱,离心30 s弃穿透液。
5. 膜消化:先以RNA Wash Buffer润洗,再加DNase I工作液室温静置15 min。
6. 深度洗涤:依次用PreWash与Wash Buffer各洗两次,离心去残液。
7. 无核酸酶水洗脱:加≥50 µl DNase/RNase-Free Water,离心1 min收集RNA。
五、注意事项
1. 防降解:样本离体后立即浸入TRI Reagent®,短期-80 °C保存,操作戴手套口罩。
2. 控样本:组织≤10 mg、细胞≤1×10^6,避免超载导致得率下降。
3. 除盐:最后一次洗涤后空柱离心≥1 min,彻底去除乙醇残留。
4. 检纯度:若A230偏高,可增加Wash Buffer洗涤次数或延长离心时间。
5. 分装保存:RNA洗脱后置于-80 °C并避免反复冻融,长期实验建议分装。
六、相关产品推荐
1. TRI Reagent(货号:R2050-1-200/R2050-1-50):经典酸-硫氰酸胍-酚单相裂解液,用于动植物及微生物总RNA/DNA/蛋白同步提取
2. DNA/RNA Shield(货号:R1100-50):样本采集即稳定核酸与灭活病原体,兼容室温运输与长期保存
3. RNA Clean & Concentrator-5(货号:R1013):快速浓缩并进一步去除盐与抑制剂,提高RNA样品纯度
4. ZR BashingBead™ Lysis Tubes(货号:S6003/S6012/S6014):高通量珠磨研磨管,适用于坚硬组织及微生物高效裂解
5. Proteinase K Set(货号:D3001-2-20):高活性蛋白酶,用于高蛋白样本前处理,提升RNA得率与纯度