一、基本信息
产品编号:D6105
核心特点:无酚氯仿/20 min完成/广谱破壁/高得率高完整度
产品描述:Zymo Research Quick-DNA Fungal/Bacterial Midiprep Kit采用高密度 BashingBeads™ 机械裂解配合 Zymo-Spin™ V-E 中量柱,可在 20 min 内从 250–500 mg 难裂真菌(酵母、霉菌、孢子)及革兰氏阳性/阴性细菌中纯化出 25–35 kb 主片段、总量高达 125 µg 的无抑制基因组 DNA,全程无需酚、氯仿及蛋白酶消化,洗脱体积 150 µl,可直接用于 PCR、qPCR、芯片及 NGS。
二、产品应用
Zymo Research Quick-DNA Fungal/Bacterial Midiprep Kit适用于中量样本的微生物总 DNA 快速提取:
△ 真菌学研究:酵母、丝状真菌及孢子基因组制备
△ 细菌学分析:革兰氏阳性/阴性菌株 DNA 获取
△ 宏基因组辅助:纯培养菌落的高通量前处理
△ 分子检测:qPCR、16S/ITS 测序、微生物组 NGS 建库
三、产品优势
✅ 极速流程:20 min 内完成裂解至洗脱,节省实验时间。
✅ 高兼容性:同时处理真菌孢子与厚壁革兰氏阳性菌,无需额外酶解。
✅ 高完整性:所得 DNA 主带 25–35 kb,满足长片段扩增与三代测序需求。
✅ 高纯度:A260/280 >1.8,抑制剂去除彻底,下游 qPCR Ct 值稳定。
✅ 安全友好:无酚、氯仿及蛋白酶步骤,降低实验室危化品管理风。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 缓冲液配制:向 Genomic Lysis Buffer 添加 β-巯基乙醇至终浓度 0.5 % (v/v)。
2. 样本裂解:将 250–500 mg 湿重菌体悬浮于 ≤1 ml PBS 并转入 BashingBead™ 管,加入 6 ml 裂解缓冲液。
3. 机械破壁:使用 50 ml 适配器高速涡旋或研磨仪充分震荡,使细胞壁完全破裂。
4. 离心去残:≥3 000 ×g 离心 5 min,去除碎片与 beads。
5. 过滤结合:将上清经 Zymo-Spin™ V-E 柱真空或离心过滤,DNA 吸附于膜上。
6. 预洗:300 µl DNA Pre-Wash Buffer 10 000 ×g 离心 1 min。
7. 精洗:两次 400 µl g-DNA Wash Buffer 10 000 ×g 离心 1 min,彻底去除盐与蛋白。
8. 洗脱:150 µl DNA Elution Buffer 室温静置 1 min 后 10 000 ×g 离心,收集高纯 DNA。
五、注意事项
1. 防护:β-巯基乙醇具刺激性,请在通风橱内配制并佩戴手套。
2. 裂解参数:不同菌种需优化 bead-beating 强度与时间,避免过度产热。
3. 除盐:离心后务必倒空收集管,防止 Wash Buffer 残留影响 A260/280。
4. 储存:纯化 DNA 4 °C 短期保存,−20 °C 或 −80 °C 长期保存并避免反复冻融。
六、相关产品推荐
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