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Zymo Research Quick-DNA Fungal/Bacterial Midiprep Kit

货号:D6105

Quick-DNA™ Fungal/Bacterial Midiprep Kit实现无酚氯仿微生物DNA提取,20分钟中量基因组纯化即可从250–500 mg难裂真菌或革兰氏阳性/阴性细菌中获得25–35kb高完整度DNA,产量达125 µg,A260/280>1.8,适配qPCR与NGS。

一、基本信息  

产品编号:D6105  

核心特点:无酚氯仿/20 min完成/广谱破壁/高得率高完整度  

产品描述:Zymo Research Quick-DNA Fungal/Bacterial Midiprep Kit采用高密度 BashingBeads™ 机械裂解配合 Zymo-Spin™ V-E 中量柱,可在 20 min 内从 250–500 mg 难裂真菌(酵母、霉菌、孢子)及革兰氏阳性/阴性细菌中纯化出 25–35 kb 主片段、总量高达 125 µg 的无抑制基因组 DNA,全程无需酚、氯仿及蛋白酶消化,洗脱体积 150 µl,可直接用于 PCR、qPCR、芯片及 NGS。

二、产品应用  

Zymo Research Quick-DNA Fungal/Bacterial Midiprep Kit适用于中量样本的微生物总 DNA 快速提取:  

△ 真菌学研究:酵母、丝状真菌及孢子基因组制备  

△ 细菌学分析:革兰氏阳性/阴性菌株 DNA 获取  

△ 宏基因组辅助:纯培养菌落的高通量前处理  

△ 分子检测:qPCR、16S/ITS 测序、微生物组 NGS 建库

三、产品优势  

✅ 极速流程:20 min 内完成裂解至洗脱,节省实验时间。  

✅ 高兼容性:同时处理真菌孢子与厚壁革兰氏阳性菌,无需额外酶解。  

✅ 高完整性:所得 DNA 主带 25–35 kb,满足长片段扩增与三代测序需求。  

✅ 高纯度:A260/280 >1.8,抑制剂去除彻底,下游 qPCR  Ct 值稳定。  

✅ 安全友好:无酚、氯仿及蛋白酶步骤,降低实验室危化品管理风。

四、使用说明(实验流程概要)  

1. 缓冲液配制:向 Genomic Lysis Buffer 添加 β-巯基乙醇至终浓度 0.5 % (v/v)。  

2. 样本裂解:将 250–500 mg 湿重菌体悬浮于 ≤1 ml PBS 并转入 BashingBead™ 管,加入 6 ml 裂解缓冲液。  

3. 机械破壁:使用 50 ml 适配器高速涡旋或研磨仪充分震荡,使细胞壁完全破裂。  

4. 离心去残:≥3 000 ×g 离心 5 min,去除碎片与 beads。  

5. 过滤结合:将上清经 Zymo-Spin™ V-E 柱真空或离心过滤,DNA 吸附于膜上。  

6. 预洗:300 µl DNA Pre-Wash Buffer 10 000 ×g 离心 1 min。  

7. 精洗:两次 400 µl g-DNA Wash Buffer 10 000 ×g 离心 1 min,彻底去除盐与蛋白。  

8. 洗脱:150 µl DNA Elution Buffer 室温静置 1 min 后 10 000 ×g 离心,收集高纯 DNA。  

五、注意事项  

1. 防护:β-巯基乙醇具刺激性,请在通风橱内配制并佩戴手套。  

2. 裂解参数:不同菌种需优化 bead-beating 强度与时间,避免过度产热。  

3. 除盐:离心后务必倒空收集管,防止 Wash Buffer 残留影响 A260/280。  

4. 储存:纯化 DNA 4 °C 短期保存,−20 °C 或 −80 °C 长期保存并避免反复冻融。  

六、相关产品推荐  

1. Quick-DNA™ Fungal/Bacterial Miniprep Kit(货号:D6005):50 次小量提取,适合单菌落或低生物量样本  

2. Quick-DNA™ Fungal/Bacterial Microprep Kit(货号:D6007):50 次微量提取,兼容 96 孔板自动化平台  

3. Quick-DNA™ Fungal/Bacterial 96 Kit(货号:D6006):2×96 孔高通量版,满足大规模筛选与微生物组研究  

4. ZymoBIOMICS® DNA Miniprep Kit(货号:D4300):针对粪便、土壤、水体等复杂基质微生物组提取  

5. Zymo-Seq™ SPLAT DNA Library Kit(货号:D5464):快速构建 Illumina 兼容文库,与本品 DNA 直接配套使用


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