一、基本信息

产品名称：2x Color SYBR Green qPCR Master Mix (ROX1)

产品货号：A0016-R1/A0016-R1-L

规格：500/2500 Rxns, 20 μl/Rxn

保存温度：-20°C避光保存

二、产品介绍

本产品是一款预混型SYBR Green I染料法qPCR反应预混液，包含热启动DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green I染料、高浓度ROX1染料及红色示踪染料。其优化的缓冲体系可提供高扩增效率、强抗干扰能力及高特异性，适用于多种实时荧光定量PCR仪。独特的彩色示踪系统有助于降低加样错误。

三、产品应用

本产品适用于基于SYBR Green I染料法的实时荧光定量PCR（qPCR）实验。

△基因表达分析：用于检测特定基因的mRNA表达水平。

△基因分型：通过熔解曲线分析进行SNP分型或突变检测。

△病原体检测：对病毒、细菌等病原体核酸进行定性或定量分析。

△拷贝数变异分析：用于检测基因组DNA的拷贝数变化。

四、产品优势

✅高效扩增：采用高性能热启动DNA聚合酶与优化缓冲液，确保快速、高效的扩增。

✅高特异性：优化的反应体系与熔解曲线分析功能，保障扩增产物的特异性。

✅强抗干扰：对常见PCR抑制剂（如血液成分、肝素等）具有较好的耐受性。

✅操作便捷：预混体系，仅需加入模板、引物和水即可进行反应，简化操作流程。

✅彩色示踪：内置红色染料，与配套彩色逆转录试剂生成的蓝色cDNA混合后变为紫色，提供直观的加样指示，减少错误。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：将2x Color SYBR Green qPCR Master Mix (ROX1)从-20°C取出，室温融化并轻柔颠倒混匀，短暂离心后置于冰上备用。

2. 模板稀释：将逆转录获得的cDNA模板用无核酸酶水进行适当倍数稀释（通常建议5-10倍），并充分混匀。

3. 反应体系配制：在冰上按比例混合预混液、引物、稀释后的cDNA模板及无核酸酶水，配制qPCR反应体系。

4. 混匀离心：加样完成后密封反应板或管，使用离心机以1000 rpm离心1分钟，确保反应液集中于管底。

5. 上机运行：将反应板置于qPCR仪上，设置合适的扩增程序（通常包括预变性、循环扩增及熔解曲线分析阶段）并启动运行。

六、注意事项

1. 引物验证：实验前需验证引物特异性与扩增效率，通过分析扩增曲线与熔解曲线进行确认。

2. 引物保存：经验证有效的引物应分装后于-20°C保存，避免反复冻融导致的降解与污染。

3. 模板质量：RNA完整性及cDNA质量是影响qPCR结果的关键因素，建议使用高质量RNA并尽快进行逆转录，cDNA长期保存建议置于-80°C。

4. 试剂混匀：使用前务必充分混匀预混液，以确保各组分浓度均一，这对实验重复性至关重要。

5. 污染防控：实验操作需在洁净区域进行，使用无核酸酶耗材，并设置无模板对照以监控污染。

七、相关产品推荐

1. Color Reverse Transcription Kit(with gDNA Remover)（货号：A0010CGQ）

2. 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix (ROX2) (A0012-R2)（货号：A0012-R2）