一、基本信息
产品编号:TR205-50/TR205-200/TR205-D-50/TR205-D-200
核心特点:快速、高效、广谱兼容、高纯度
产品描述:本试剂盒提供了一种简化的柱式纯化方案,用于从经TRIzol®、TRI Reagent®或同类裂解液处理后的各类生物样品(包括细胞、组织、细菌、植物、酵母及生物液体)中高效提取高质量的总RNA,该RNA包含small RNA/microRNA成分。纯化过程无需苯酚-氯仿抽提和异丙醇沉淀,可在约10分钟内完成,所得RNA完整性好,DNA残留极低,适用于下游高灵敏度应用。
二、产品应用
本产品适用于从经裂解液处理的样品中快速纯化总RNA(含microRNA),用于多种分子生物学分析。
△RT-qPCR:纯化的RNA可直接用于逆转录定量PCR,进行基因表达分析。
△下一代测序(NGS):所得高纯度RNA适用于RNA-seq、small RNA-seq等文库构建。
△Northern印迹:提取的RNA完整性好,可用于Northern Blot杂交分析。
△芯片分析:适用于基因表达谱芯片等微阵列技术。
三、产品优势
✅快速高效:整个纯化流程仅需约10分钟,无需相分离和醇沉淀步骤,显著缩短实验时间。
✅广谱兼容:可直接处理已储存于TRIzol®、TRI Reagent®或基于胍盐的同类裂解液中的样品,应用范围广泛。
✅高纯度与完整性:纯化的RNA A260/A280及A260/A230比值通常大于1.8,且能有效回收包括small RNA(≥17 nt)在内的总RNA,适用于严苛的下游应用。
✅灵活配置:提供含或不含DNase I的试剂盒规格,用户可根据实验需求选择是否在柱上进行基因组DNA消化。
✅安全便捷:裂解液成分能有效抑制RNase并灭活潜在病原体,结合柱式纯化,操作更安全简便。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样品裂解:使用兼容的裂解液(如TRIzol®)充分裂解样品并均质化。
2. 结合与上柱:将裂解产物转移至提供的纯化柱中,离心使RNA结合至硅胶膜。
3. 柱上消化(可选):若使用含DNase I的试剂盒,此步骤在膜上加入DNase I混合液孵育以去除基因组DNA。
4. 洗涤:依次使用配制好的洗涤液1和洗涤液2洗涤纯化柱,彻底去除杂质。
5. 洗脱:使用无RNase/DNase水洗脱柱膜,收集高纯度的总RNA。
五、注意事项
1. 个人防护:操作须由专业人员在适当条件下进行,务必佩戴手套、护目镜等防护装备。
2. 无酶环境:整个操作过程应在清洁环境中进行,并使用无RNase的耗材,以防止RNA降解。
3. 试剂储存:试剂使用后应立即盖紧瓶盖,避免暴露;配制好的含乙醇洗涤液需标记清楚;复溶后的DNase I应分装并于-20°C保存。
4. 样品保存:裂解后的样品若需暂存,应置于-80°C,并尽快完成RNA纯化步骤以保证得率与质量。
5. 避免污染:不同洗涤液需按顺序使用,切勿混用或使用其他非指定溶液替代,以免影响纯化效果。
六、相关产品推荐
1. EZ Shield®固体样品保护剂(货号:TR110):用于常温下稳定保存组织等固体样本中的RNA,便于运输与储存。
2. EZ Shield®2×液体样品保护剂(货号:TR120):用于稳定血液、体液等液体样本中的RNA,防止降解。