一、基本信息
产品编号:TD408-50/TD408-200
核心特点:高回收率,高纯度,兼容性强,操作便捷
产品描述:本试剂盒采用柱纯化技术,可从琼脂糖凝胶中高效回收DNA片段。其优化的溶胶液配方具有良好的缓冲能力,能有效去除杂质,获得适用于多种下游分子生物学实验的超纯DNA。试剂盒兼容TAE或TBE缓冲体系,回收片段范围宽泛,操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂。
二、产品应用
本产品主要用于从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段。
△DNA片段回收:从TAE或TBE缓冲的琼脂糖凝胶中回收50 bp至23 kb的DNA片段。
△下游应用支持:回收的DNA适用于测序、连接、酶切、克隆、标记等后续实验。
三、产品优势
✅高回收效率:对于50 bp至10 kb的DNA片段,回收率可达60%-90%,对于11 kb至23 kb的片段,回收率为50%-70%。
✅高纯度保障:采用优化的缓冲体系,能有效去除琼脂糖、盐离子等杂质,洗脱所得DNA纯度高,不抑制下游酶反应。
✅广泛兼容性:与常规TAE及TBE缓冲液配制的琼脂糖凝胶兼容,适用性广。
✅操作安全便捷:全程无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,也无需进行乙醇沉淀,实验流程快速简单。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 切胶:将含有目标DNA片段的琼脂糖凝胶块切下,尽量减小凝胶体积,转移至离心管中。
2. 溶胶:向凝胶块中加入3倍体积的溶胶液,于37-55℃水浴孵育至凝胶完全溶解;对于大于8 kb的DNA片段,溶解后需补加与凝胶块等体积的水。
3. 上柱:将溶解液转移至2号CR纯化柱中,离心,弃滤液;若样品体积超过800 µL,需分次上柱。
4. 洗涤:向纯化柱中加入DNA洗涤液,离心,弃滤液,该步骤需重复一次。
5. 洗脱:向纯化柱膜中央加入25 µL DNA洗脱液或水,离心,收集管中的液体即为纯化的DNA。
五、注意事项
1. 安全防护:操作时需佩戴手套及护目镜,部分试剂具刺激性,应在通风良好处使用。
2. 溶液配制:DNA洗涤液使用前需按说明书要求加入指定体积的无水乙醇,配制后请做好标记。
3. 凝胶溶解:确保凝胶块完全溶解是保证高回收率的关键步骤,水浴时可轻柔振荡以助溶。
4. 洗脱优化:为提升大片段DNA(>6 kb)的回收效率,可在加入洗脱液后室温静置1分钟;对于>10 kb的片段,建议使用60-70℃预热的洗脱液。
5. 储存条件:试剂使用后应立即盖紧瓶盖,避免长时间暴露于空气,并按指示于室温储存。
六、相关产品推荐
1. 通用型DNA纯化回收试剂盒(货号:TD409-50):用于从溶液或酶反应体系中纯化回收DNA,操作快速。
2. 质粒DNA快速小量提取试剂盒(货号:TD428):用于从细菌培养物中快速小量提取高纯度质粒DNA。