一、基本信息
产品货号:TR115-50/TR115-200/TR113-50/TR113-200
核心特点:快速高效、高纯度、兼容性强、可柱上消化
产品介绍:本RNA纯化浓缩试剂盒采用优化的硅胶膜离心柱技术,为从多种来源样本中纯化与浓缩RNA提供了一种简便可靠的解决方案。该试剂盒能够高效回收长度大于等于17个核苷酸的总RNA,包括小RNA和大RNA,并通过优化的洗涤步骤有效去除杂质,最终可获得高纯度、无DNA污染的RNA产物。洗脱体积可低至10微升,适用于对RNA浓度和完整性要求较高的下游应用。
二、产品应用
本RNA纯化浓缩试剂盒适用于多种来源RNA的纯化与浓缩。
△酶反应产物纯化:纯化如体外转录、RNA修饰等酶促反应后的RNA产物。
△相分离产物处理:对TRIZOL等酚-氯仿法提取后的水相RNA进行进一步纯化。
△总RNA再纯化:对已提取的总RNA样本进行去杂质、浓缩或缓冲液置换。
△小RNA富集:选择性回收17-200 nt范围内的小RNA及microRNA。
△大RNA分离:选择性回收大于200 nt的大片段RNA。
三、产品优势
✅高纯度:纯化后的RNA其A260/A280与A260/A230比值通常均大于1.8,满足高通量测序、RT-qPCR等对纯度要求严苛的应用。
✅高效率:基于独特的缓冲液体系,结合与洗脱步骤快速,可在约5分钟内完成核心操作流程。
✅高兼容性:可处理来源于酶反应体系、有机溶剂相分离产物等多种复杂样本,适用性广。
✅去DNA污染:提供柱上DNase I消化步骤(部分货号包含),可有效去除痕量基因组DNA污染。
✅灵活洗脱:支持最小10μl的低体积洗脱,便于实现RNA样本的高倍浓缩。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本结合:向RNA样本中加入2倍体积的RNA结合液,混匀后加入等体积无水乙醇。
2. 上柱吸附:将混合液转移至纯化柱中,于10,000-16,000 x g离心1分钟,弃滤液。
3. DNase消化(可选):向柱膜中央加入DNA消化液与DNase I混合液,室温孵育以消化残留DNA。
4. 洗涤1:加入400μl RNA洗涤液,离心1分钟,弃滤液。
5. 预洗涤:加入400μl RNA预洗液,离心1分钟,弃滤液。
6. 洗涤2:加入700μl RNA洗涤液,离心1分钟,弃滤液。
7. 洗涤3:加入400μl RNA洗涤液,离心2分钟以彻底去除残留乙醇,弃滤液及收集管。
8. RNA洗脱:将纯化柱置于新离心管中,向膜中央加入10-15μl无酶水,室温静置2分钟后离心1分钟,收集洗脱液。
五、注意事项
1. 试剂保存:部分试剂需按说明书添加无水乙醇后使用,配制后需明确标记;所有试剂使用后应立即盖紧,避免挥发或污染。
2. RNase防护:整个操作过程应在无RNase污染的环境中进行,并使用无RNase的耗材。
3. 离心条件:所有离心步骤均需在10,000-16,000 x g的离心力下进行,以确保液体完全穿透。
4. 乙醇残留:最后的洗涤步骤离心2分钟至关重要,能确保去除柱膜上残留的乙醇,避免影响下游酶反应。
5. 样本兼容性:对于含有高浓度盐、甲酰胺或蔗糖等成分的样本,可能会影响结合效率,建议进行预实验或调整样本量。
六、相关产品推荐
1. 总RNA提取试剂盒(货号:根据系统推荐):适用于从多种动植物组织或细胞中直接提取完整的总RNA。
2. 小RNA提取试剂盒(货号:根据系统推荐):专门为高效富集18-200 nt小RNA片段(如miRNA)而优化设计。
3. 病毒RNA提取试剂盒(货号:根据系统推荐):针对血清、血浆等体液样本中的病毒RNA进行快速纯化。
4. 基因组DNA清除试剂盒(货号:根据系统推荐):用于深度去除RNA样本中残留的基因组DNA污染。