一、基本信息
产品编号:TD407-50/TD407-200
核心特点:快速高效、高回收率、高纯度、操作简便
产品描述:本试剂盒采用基于硅胶膜吸附原理的离心柱技术,专为从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段而设计。其优化的溶胶液配方能高效溶解琼脂糖,无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂,可在约15分钟内完成操作。回收的DNA纯度高,适用于多种下游分子生物学应用。
二、产品应用
本琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒适用于从琼脂糖凝胶中纯化DNA片段,以进行后续实验。
△DNA连接:为连接酶反应提供高纯度DNA底物。
△测序分析:回收的DNA可直接用于Sanger测序或高通量测序建库。
△PCR扩增:纯化的DNA片段可作为模板进行二次PCR扩增。
△酶切与标记:适用于限制性内切酶消化、探针标记等酶学反应。
△克隆与转化:为分子克隆实验提供高质量的插入片段或载体。
三、产品优势
✅高效快速:整个纯化流程可在15分钟内完成,显著提升实验效率。
✅高回收率:对于50 bp至10 kb的DNA片段,回收率可达70-90%;对于更大片段(11-23 kb),回收率稳定在50-70%。
✅高纯度:洗脱DNA的A260/A280比值理想,有效去除琼脂糖、盐离子及酶抑制物,兼容多种高灵敏度下游应用。
✅操作安全:全程无需接触苯酚、氯仿等有毒有机试剂,实验环境更安全。
✅灵活洗脱:独特的离心柱设计支持使用≥10 µl的最小洗脱体积,可获得高浓度DNA溶液。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 切胶:使用洁净刀片将含目标DNA片段的琼脂糖凝胶块切下,并转移至离心管中。
2. 溶胶:向凝胶块中加入3倍体积的ADB溶胶液,于37-55°C温浴至凝胶完全溶解。
3. 上柱:将溶解液转移至套在收集管中的1号C纯化柱内。
4. 结合:室温离心1分钟,弃去收集管中的滤液,使DNA结合于硅胶膜上。
5. 洗涤:向纯化柱中加入200 µl已配制的DNA洗涤液,离心1分钟,弃滤液。
6. 二次洗涤:重复步骤5的洗涤操作一次。
7. 干燥:可选步骤,空柱离心2分钟以彻底去除残留乙醇。
8. 洗脱:向纯化柱膜中央直接加入10-30 µl DNA洗脱液或去离子水,室温静置1-2分钟后离心1分钟,收集洗脱液中的DNA。
五、注意事项
1. 安全防护:操作时需佩戴手套、护目镜等个人防护装备,部分试剂具有刺激性,应在通风良好处使用。
2. 溶液配制:使用前需按说明书要求向DNA洗涤液浓缩液中加入指定体积的无水乙醇,配制后请于瓶身做好标记。
3. 温度控制:凝胶溶解温度应严格控制在37-55°C之间,温度过高可能导致DNA变性,降低回收率。
4. 完全溶胶:确保凝胶块完全溶解,未溶解的琼脂糖颗粒会堵塞纯化柱并影响DNA纯度与回收率。
5. 洗脱优化:为提升大片段DNA(≥10 kb)的洗脱效率,可将洗脱液预热至60-70°C,并延长柱上孵育时间至2-5分钟。
6. 避免污染:转移纯化柱时,避免柱底接触废液,以防盐分或乙醇残留污染最终洗脱产物。
六、相关产品推荐
1. 通用DNA纯化回收试剂盒(货号:TD409):用于从从琼脂糖凝胶或PCR反应液等中纯化回收DNA片段。
2. 质粒DNA快速小量提取试剂盒(货号:TD428):用于从细菌培养物中快速小量提取高纯度质粒DNA。