一、基本信息
产品编号:TD409-50/TD409-200
核心特点:快速、高效、高回收率
产品描述:本试剂盒采用柱纯化技术,专为从琼脂糖凝胶、PCR反应液或酶切反应液中快速回收纯化DNA片段而设计。其独特的配方与微量柱结构,可在约15分钟内完成操作,无需使用有机溶剂,并能实现高浓度、高纯度的DNA洗脱,适用于多种下游分子生物学应用。
二、产品应用
通用DNA纯化回收试剂盒纯化的DNA适用于多种分子克隆与检测实验。
△DNA连接:为连接反应提供高纯度DNA模板。
△测序:纯化后的DNA满足测序对模板纯度的要求。
△标记反应:适用于放射性或非放射性标记等DNA标记实验。
△PCR:回收的DNA可作为模板进行二次扩增。
△限制性内切酶消化:纯化DNA可直接用于酶切分析。
三、产品优势
✅快速:整个纯化流程可在约15分钟内完成,显著提升实验效率。
✅高效:对于100bp-10kb的DNA片段,回收率可达70-90%,回收产量高。
✅高纯度:洗脱的DNA杂质残留少,A260/A280比值理想,适用于多种精密实验。
✅广谱性:可有效回收100bp至23kb范围内的DNA片段,适用性广泛。
✅便捷:操作步骤精简,无需苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,安全环保。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样品处理:将含目标DNA的琼脂糖凝胶块切下,转移至离心管中,并尽量去除多余凝胶。
2. 凝胶溶解:向凝胶块中加入3倍体积的ADB溶胶液,于55℃水浴孵育至凝胶完全溶解。
3. 上柱结合:将溶解液转移至纯化柱中,离心使DNA结合于柱膜。
4. 洗涤:向柱中加入配制好的DNA洗涤液,离心以去除杂质。
5. 二次洗涤:重复洗涤步骤一次,确保彻底去除盐分等杂质。
6. 离心干燥:进行额外离心以去除残留乙醇,避免抑制下游反应。
7. 洗脱:向柱膜中央加入10-15μl DNA洗脱液或水,离心收集高浓度DNA。
五、注意事项
1. 安全防护:操作时需佩戴手套及护目镜,部分试剂具刺激性,应在通风良好处使用。
2. 溶液配制:使用前务必按说明书向DNA洗涤液瓶中加入指定体积的无水乙醇,并做好标记。
3. 温度控制:凝胶溶解温度建议维持在37-55℃,温度过高可能导致DNA变性。
4. 完全溶解:务必确保凝胶块完全溶解,未溶解的胶块会堵塞纯化柱并影响回收率。
5. 洗脱优化:为提升大片段DNA(>10kb)的回收率,可让洗脱液在柱膜上静置1-2分钟后再离心,或使用预热的洗脱液。
6. 避免污染:转移纯化柱时,注意柱尖勿接触收集管中的废液,以防盐分污染。
六、相关产品推荐
1. 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(货号:TD407-10/TD407-50/TD407-200):适用于常规琼脂糖凝胶中DNA片段的回收纯化。
2. 长片段DNA回收试剂盒(货号:TD4045/TD4046):专为高效回收长片段DNA(>10kb)而优化。