一、基本信息
产品名称:Puromycin嘌呤霉素二盐酸盐溶液
产品货号:ant-pr-1/ant-pr-5/ant-pr-5b
规格:100mg(10×1mL),500mg(50×1mL),500mg(1×50mL)
保存温度:建议收货后储存于4°C或-20°C
二、产品介绍
本产品为经过无菌过滤的10毫克/毫升嘌呤霉素二盐酸盐溶液,配制于HEPES缓冲液中。它是一种由白色链霉菌产生的氨基核苷类抗生素,通过抑制核糖体的肽基转移反应,对原核和真核细胞均具有广谱的抑制活性,广泛应用于稳定转染细胞株的筛选。
三、产品应用
本产品嘌呤霉素二盐酸盐溶液主要应用于稳定转染细胞系的筛选。具体应用包括:
△稳定细胞系筛选:用于筛选携带嘌呤霉素抗性基因(如pac基因)的哺乳动物、昆虫或细菌稳定转染子。
△基因功能研究:作为筛选标记,在研究基因功能或构建稳定表达特定基因的细胞系时使用。
△原核筛选:用于筛选携带抗性基因的大肠杆菌等原核生物转化子。
四、产品优势
✅高纯度:经高效液相色谱分析,纯度不低于98%,确保筛选效果稳定可靠。
✅低内毒素:内毒素含量低于5 EU/毫克,适用于对内毒素敏感的细胞培养实验。
✅严格质控:每批次产品均经过全面的理化性质分析和细胞培养验证,保证批次间一致性。
✅即用型溶液:以10毫克/毫升的即用型溶液形式提供,使用方便,减少称量误差。
✅细胞验证:效价已在嘌呤霉素敏感型和抗性型哺乳动物细胞系中得到验证,确保筛选活性。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 浓度优化:针对特定细胞系,通过杀灭曲线实验确定其完全死亡所需的最低有效嘌呤霉素浓度。
2. 培养基配制:根据优化后的浓度,将适量嘌呤霉素溶液加入完全细胞培养基中,混匀。
3. 细胞加药:在细胞转染后适当时间(通常为24-72小时),弃去旧培养基,更换为含药筛选培养基。
4. 维持筛选:定期更换含药筛选培养基,持续约1-2周,直至未转染的对照细胞全部死亡。
5. 克隆鉴定:存活的细胞克隆即为潜在阳性转染子,可进行扩大培养及后续分子生物学鉴定。
六、注意事项
1. 储存稳定性:产品在室温下可稳定保存3个月,长期储存建议置于-20°C,并避免反复冻融。
2. 结晶处理:储存过程中可能出现结晶沉淀,使用前可在37°C水浴中加热30分钟使其完全溶解,此过程不影响产品活性。
3. 安全操作:嘌呤霉素为有害化合物,操作时应穿戴适当的个人防护装备,并在生物安全柜内进行,具体请参阅产品安全数据表。
4. 无菌操作:开封及使用时需遵循无菌操作规范,避免污染。
5. 浓度参考:对于常见哺乳动物细胞系(如HEK293、HeLa),推荐起始筛选浓度范围为0.5-10微克/毫升,具体浓度需根据细胞系优化。
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