一、基本信息
产品名称:Lipofectamine® RNAiMAX Reagent
产品货号:13778100/13778030/13778075/13778150/13778500
规格:提供0.1 mL、0.3 mL、0.75 mL、1.5 mL及15 mL多种规格。
递送分子类型:小分子RNA,包括siRNA、Silencer® Select siRNA、Stealth® RNAi、mirVana™ miRNA模拟物及抑制剂。
细胞类型:广泛适用于多种真核细胞。
二、产品概述
Lipofectamine® RNAiMAX转染试剂是一种专为高效递送小分子RNA至真核细胞而设计的阳离子脂质体试剂。该试剂形成的RNA-脂质复合物可在含血清或抗生素的完全培养基中直接用于转染,无需后续更换培养基,操作简便,适用于基因功能研究与高通量筛选。
三、产品应用
△基因功能研究:通过高效递送siRNA或miRNA模拟物/抑制剂,在多种细胞中实现靶基因的敲低或调控,用于探索基因功能。
△高通量筛选:其稳定的性能与可规模化的操作流程,使其成为基于RNAi技术进行高通量药物靶点或功能基因组学筛选的理想工具。
△细胞信号通路分析:利用特异性小RNA分子干扰特定基因表达,有助于解析复杂的细胞信号转导网络与调控机制。
四、产品优势与特点
✅高效递送:专有配方可高效包载并递送多种小RNA分子进入细胞,实现高转染效率与基因沉默效果。
✅操作简便:转染复合物可直接加入含血清的完全培养基中,无需后续更换培养基,简化了实验流程。
✅广泛适用:适用于多种贴壁和悬浮真核细胞系,具有广泛的细胞兼容性。
✅灵活兼容:转染过程对抗生素和血清具有耐受性,为实验设计提供了更大的灵活性。
✅高通量友好:支持正向与反向转染模式,其中反向转染方案特别适合高通量实验,可显著提升实验通量。
五、使用说明(概述)
本部分概述基于DNA的瞬时转染标准操作流程,具体步骤需根据实验目的调整。
1. 细胞铺板:在转染当天,将细胞接种至培养板中,使其在转染时密度达到60-80%汇合度。
2. 试剂稀释:使用Opti-MEM® Reduced Serum Medium分别稀释Lipofectamine® RNAiMAX试剂与待转染的DNA。
3. 复合物制备:将稀释后的DNA与稀释后的转染试剂以1:1体积比混合,轻柔混匀。
4. 复合物孵育:将混合液在室温下静置孵育5分钟,以形成稳定的DNA-脂质复合物。
5. 复合物添加:将孵育好的DNA-脂质复合物均匀滴加至细胞培养基中,轻柔摇晃培养板使其混匀。
6. 细胞培养:将细胞置于37°C、5% CO2的培养箱中继续培养1-3天,随后进行表达分析。
六、注意事项
1. 储存条件:本品需置于4°C保存,请勿冷冻,以免影响试剂活性。
2. 复合物制备:必须使用无血清培养基(如Opti-MEM®)配制RNA-脂质复合物,以确保复合物形成效率。
3. 细胞状态:使用健康、处于对数生长期的细胞进行转染,并确保转染时细胞汇合度适宜,这是获得高转染效率的关键。
4. 浓度优化:建议以10 nM RNAi双链体作为起始浓度,并根据具体细胞类型和靶基因进行浓度优化。
5. 反向转染:进行反向转染时,建议使用常规方法2.5倍数量的细胞,以补偿细胞与复合物在同一天制备的影响。
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