一、基本信息
产品名称:细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒
产品货号:C0602
规格:>100次
保存条件:-20°C避光保存
二、产品介绍
本试剂盒用于检测细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶活性。其原理是利用衰老细胞在pH 6.0时高表达的SA-β-Gal酶催化底物X-Gal生成不溶性蓝色沉淀,从而在光学显微镜下实现对衰老细胞或组织的特异性染色与可视化鉴定。该检测方法广泛应用于细胞衰老机制、肿瘤抑制及组织老化等研究领域。
三、产品应用
本细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒主要用于以下研究:
△细胞衰老研究:体外培养细胞的衰老状态鉴定与定量分析。
△组织衰老分析:适用于冰冻组织切片的衰老细胞定位观察。
△肿瘤生物学研究:探究肿瘤抑制与细胞衰老之间的关联。
△药物筛选:评估化合物或处理对细胞衰老进程的诱导或抑制效果。
△衰老相关疾病模型:在研究衰老相关疾病的细胞或动物模型中检测衰老细胞。
四、产品优势
✅材质兼容性:经过优化,染色工作液兼容聚苯乙烯等常见实验室耗材质,避免因材质不匹配导致的沉淀问题,操作简便。
✅染色特异性:在pH 6.0的优化条件下反应,特异性识别衰老相关β-半乳糖苷酶的活性,背景清晰。
✅结果直观:染色产物为深蓝色不溶性沉淀,可在普通光学显微镜下直接观察与成像,无需复杂设备。
✅应用灵活:既适用于贴壁细胞与悬浮细胞的检测,也适用于组织冰冻切片。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本准备:吸弃培养液,使用PBS或HBSS缓冲液洗涤细胞。
2. 细胞固定:加入适量β-半乳糖苷酶染色固定液,室温孵育15分钟。
3. 洗涤:吸弃固定液,使用PBS或HBSS缓冲液充分洗涤样本3次。
4. 工作液配制:按说明书比例将X-Gal溶液与染色液A、B、C混合,配制新鲜染色工作液。
5. 染色孵育:向样本中加入足量染色工作液,37°C(非CO₂环境)避光孵育过夜。
6. 观察与保存:吸弃染色液,用PBS覆盖样本,于光学显微镜下观察。可于4°C PBS中短期保存或封片后长期保存。
六、注意事项
1. 孵育环境:染色反应需在37°C恒温箱中进行,严禁使用CO₂培养箱,以防pH变化导致染色失败。
2. 结晶处理:染色过程中若出现结晶影响观察,可用70%乙醇短暂洗涤溶解结晶,再用PBS替换。
3. 样本限制:本试剂盒适用于细胞样本及冰冻切片,不推荐用于石蜡包埋切片。
4. 试剂溶解:使用前确保各组分,特别是染色液B及配制好的工作液完全溶解、澄清,无沉淀。
5. 边缘效应:使用多孔板长时间孵育时,需采取弃用边缘孔、使用湿盒或防挥发盖等措施以减少蒸发带来的边缘效应。
6. 安全防护:固定液具腐蚀性,操作时需穿戴实验服与手套,在通风良好处进行。
7. 用途限定:本产品仅供科研使用。
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