一、基本信息
产品编号:BL590
规格:200mL
产品描述:本品是一种密度为1.077 g/mL的等渗溶液,专为从人外周血中分离淋巴细胞而设计。其原理基于密度梯度离心,利用淋巴细胞与其他血细胞密度的差异,实现高效分离,淋巴细胞得率通常大于80%。
二、产品应用
人淋巴细胞分离液主要用于从人外周血中高效分离淋巴细胞,适用于多种免疫学研究。
△免疫细胞分离:用于分离外周血单个核细胞中的淋巴细胞群体。
△细胞功能研究:为淋巴细胞增殖、细胞毒性和细胞因子分泌等实验提供高纯度细胞来源。
△免疫学检测:作为流式细胞术、ELISPOT等免疫学检测技术的前期样本制备步骤。
△细胞培养:分离获得的淋巴细胞可用于原代培养及相关体外实验。
三、产品优势
✅高特异性:基于精确的密度设计,能有效区分淋巴细胞与粒细胞、红细胞。
✅高得率:优化配方和离心条件,确保淋巴细胞回收率高于80%。
✅保持活性:等渗环境及温和的分离过程,有助于维持分离后淋巴细胞的活性和功能。
✅操作灵活:提供针对不同样本量的详细操作方案,适应多种实验需求。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 样本准备:取新鲜抗凝血,使用等体积的PBS或Hanks平衡盐溶液(不含Ca2+/Mg2+)进行稀释混匀。
2. 建立梯度:将适量分离液加入离心管,小心将稀释后的血液样本平铺于分离液液面之上。
3. 密度离心:根据样本量选择合适的离心管和离心条件(例如:400-650 g,20-30分钟),进行离心。
4. 细胞收集:离心后,小心吸取位于血浆层与分离液层之间的乳白色淋巴细胞环。
5. 洗涤纯化:将收集的细胞转移至新管,加入洗涤液(如PBS)混匀,以较低离心力(如250 g)离心10分钟,弃上清,用适量缓冲液重悬细胞。
五、注意事项
1. 温度控制:整个分离过程应在20±2℃的环境下进行,以维持分离液密度稳定和细胞最佳状态。
2. 样本新鲜度:建议采血后2小时内进行分离,血液存放时间延长会显著影响细胞分离效果和活性。
3. 耗材选择:避免使用易产生静电的高聚合材料(如聚苯乙烯)离心管,推荐使用低静电离心管或未经碱处理的玻璃器皿。
4. 吸取技巧:吸取淋巴细胞层时需谨慎,避免吸入过多上层血浆或下层分离液,以减少血小板、血浆蛋白或粒细胞的污染。
5. 条件优化:由于个体血液粘度存在差异,首次实验或更换样本来源时,可能需在推荐范围内微调离心力以获得最佳分层效果。
六、相关产品推荐
1. 小鼠外周血淋巴细胞分离液(货号:BL1821A):适用于从小鼠外周血中分离淋巴细胞。
2. 1xPBS缓冲液(细胞培养)(货号:BL302A):用于血液样本稀释及分离后淋巴细胞的洗涤。
4. 红细胞裂解液(货号:BL503A):用于去除淋巴细胞制备物中可能残留的红细胞。