一、基本信息
产品名称:Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素)
产品货号:ST551-10mg/ST551-50mg/ST551-250mg
规格:ST551-10mg为10mg/ml×1ml, ST551-50mg为10mg/ml×5ml, ST551-250mg为250mg粉末
保存温度:-20℃保存
二、产品介绍
嘌呤霉素是一种来源于白色链霉菌的氨基核苷类抗生素,作为氨酰-tRNA的结构类似物,能不可逆地结合核糖体A位点,导致新生肽链合成提前终止。该产品已通过除菌过滤处理,可直接用于细胞实验,广泛应用于基于pac/puroR抗性基因的稳定细胞系筛选与维持,能快速有效地清除未成功转染或感染的细胞。
三、产品应用
Puromycin Dihydrochloride主要应用于基于抗性基因的细胞筛选与维持实验。
△稳定细胞系筛选:用于筛选成功整合并表达pac/puroR抗性基因的真核或原核细胞。
△稳定细胞系维持:在培养液中添加适量嘌呤霉素,用于维持已构建稳定细胞系的抗性压力。
△基因功能研究:在基于慢病毒、逆转录病毒载体或质粒的基因过表达、敲低(如shRNA)等研究中,用于获得阳性细胞池或单克隆。
四、产品优势
✅高效快速:作用迅速,通常在48小时内可清除99%以上的非抗性细胞。
✅作用机制明确:作为氨酰-tRNA类似物,通过掺入延伸肽链引起蛋白质合成提前终止。
✅即用型溶液:10mg/ml包装为无菌溶液,可直接用于细胞培养,使用便捷。
✅高纯度:产品纯度大于98%,确保实验结果的可靠性与一致性。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 浓度确定:通过剂量反应实验确定特定细胞系的最佳筛选浓度,哺乳动物细胞常用范围在1-10 μg/mL。
2. 细胞处理:对转染了含pac基因载体或感染相应病毒的细胞,更换为含适宜浓度嘌呤霉素的完全培养基。
3. 筛选维持:定期更换含药培养基,持续施加选择压力,直至非抗性细胞死亡,抗性细胞形成单克隆或稳定生长。
4. 后续培养:筛选完成后,可使用相同或较低浓度的嘌呤霉素进行维持性培养。
六、注意事项
1. 安全防护:本品对人体有害,操作时需穿戴实验服与手套,在通风橱中进行,避免吸入或接触皮肤。
2. 用途限定:仅限于科研使用,不可用于临床诊断、治疗或食品、药品生产。
3. 储存条件:-20℃避光保存,10mg/ml溶液应分装以避免反复冻融,确保稳定性。
4. 浓度优化:最佳筛选浓度因细胞类型及状态而异,必须进行预实验确定最低有效浓度。
七、相关产品推荐
1. Doxycycline hyclate (盐酸强力霉素) (货号:ST039A/ST039B)
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