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Toyobo东洋纺 KOD FX DNA聚合酶

货号:KFX-101

KOD FX DNA聚合酶,一种源自嗜热古菌的高性能酶,以其高保真性、强延伸能力和热启动设计而著称。适用于长片段PCR扩增和高GC含量模板扩增,提供200次反应规格,确保实验的高效与精确。适用于克隆、测序等高要求应用,优化复杂样品DNA扩增,保持-20°C保存以维持活性。

一、基本信息

产品名称:KOD FX DNA聚合酶

产品货号:KFX-101

规格:200U 200次反应

保存温度:-20°C

二、产品介绍

KOD FX是一种来源于嗜热古菌Thermococcus kodakaraensis KOD1的高性能DNA聚合酶。该酶通过热启动抗体技术,有效抑制聚合酶及3‘-5’外切酶活性,在反应前消除非特异性扩增。其具备强大的延伸能力和高保真度,可高效扩增高GC含量模板及复杂粗样品,并能进行长片段PCR。

三、产品应用

KOD FX DNA聚合酶适用于多种高要求的PCR扩增应用。

高保真扩增:用于对保真度要求高的克隆、测序等下游实验。

长片段PCR:用于扩增长达40 kb的基因组DNA片段。

复杂模板扩增:适用于高GC含量模板或来自粗样品(如全血、组织裂解液)的DNA扩增。

平端克隆:其PCR产物为平末端,可直接用于平端克隆。

四、产品优势

高保真性:其3‘-5’外切酶校对活性使错误率约为Taq DNA聚合酶的十分之一。

强延伸能力:可高效扩增复杂及长片段靶标,最大延伸长度达40 kb。

热启动设计:采用抗体介导的热启动机制,有效提高扩增特异性与灵敏度。

粗样耐受性:对多种复杂样品中的PCR抑制剂表现出良好的耐受性。

五、使用说明(实验流程概要)

1. 体系配制:在冰上按推荐比例混合2× PCR Buffer、dNTPs、引物、模板及KOD FX酶。

2. 热循环设置:根据引物Tm值及目标片段长度,设置适宜的热变性、退火及延伸温度与时间。

3. 循环反应:将反应管置于热循环仪中,运行预定的PCR循环程序。

4. 产物分析:反应结束后,取适量产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。

六、注意事项

1. 引物设计:推荐使用22-35个碱基、Tm值高于60°C的引物;长片段扩增时建议Tm≥65°C。

2. 引物纯化:扩增≥10 kb长片段时,引物需经柱层析或HPLC纯化,以避免产物拖尾。

3. 产物纯化:进行酶切等后续操作前,必须对PCR产物进行纯化,以去除残留的聚合酶及3‘-5’外切酶活性。

4. 模板质量:使用粗样品时,可能需进行预处理以优化扩增效果。

七、相关产品推荐

1. KOD-Plus- DNA聚合酶(货号:KOD-201)

2. KOD -Plus- NEO(货号:KOD-401)

3. KOD FX Neo(货号:KFX-201)


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