一、基本信息

产品编号：S0033S/S0033M

规格：S0033S >100 次， S0033M >500 次

保存温度：-20℃避光保存

产品描述：本产品为基于荧光探针DCFH-DA的活性氧检测试剂盒。该探针可自由穿透细胞膜，在胞内被酯酶水解为DCFH并被活性氧氧化，生成具有荧光的DCF，从而实现对多种细胞（动物、植物、细菌及酵母）内活性氧水平的定量或定性检测。试剂盒包含探针母液及阳性对照Rosup，适用于多种检测平台。

二、产品应用

本活性氧检测试剂盒适用于多种细胞类型内活性氧水平的检测。

△细胞氧化应激研究：用于评估药物、环境刺激等因素诱导的细胞内活性氧水平变化。

△植物生理与病理研究：检测植物细胞在生物或非生物胁迫下的活性氧爆发。

△微生物学研究：评估细菌或酵母在抗菌剂处理或环境压力下的活性氧产生。

△信号通路研究：作为检测工具，研究与活性氧相关的细胞信号转导事件。

△药物筛选与毒性评价：用于高通量筛选具有抗氧化或促氧化活性的化合物。

三、产品优势

✅高灵敏度：采用优化的DCFH-DA探针，对细胞内活性氧响应灵敏，可实现低水平活性氧的检出。

✅低背景干扰：探针设计使其在胞外无荧光，有效洗涤后能显著降低非特异性背景信号。

✅广泛适用性：检测方案兼容动物、植物、细菌及酵母等多种细胞类型与研究体系。

✅操作便捷：提供明确的阳性对照（Rosup），便于实验体系建立与结果验证。

✅多平台兼容：产生的DCF荧光信号可使用荧光显微镜、酶标仪、流式细胞仪等多种仪器进行检测。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 探针装载：根据实验设计（刺激时间长短）确定装载顺序。对于贴壁细胞，采用原位装载法，使用适当缓冲液将DCFH-DA稀释至工作浓度（通常10 μM），孵育后洗涤。对于悬浮细胞，收集后重悬于含探针的缓冲液中孵育，随后洗涤。

2. 样品刺激：将装载好探针的细胞分组，使用目标化合物或试剂盒提供的Rosup阳性对照进行刺激。

3. 荧光检测：使用荧光检测设备（如酶标仪、流式细胞仪或共聚焦显微镜）进行检测。建议设置488 nm激发波长与525 nm发射波长。

4. 数据分析：通过比较实验组与对照组（包括阴性和阳性对照）的荧光强度，分析细胞内活性氧水平的相对变化。

五、注意事项

1. 探针洗涤：探针孵育后必须充分洗涤细胞，以去除未进入细胞的探针，避免高背景荧光。

2. 检测时效：完成探针装载与洗涤后，应尽快进行检测（刺激时间除外），以减少探针自发氧化等潜在误差。

3. 耗材选择：使用荧光酶标仪检测时，需选用专用于荧光检测的黑色或白色孔板，以降低孔间光信号干扰。

4. 微生物样品：检测细菌或酵母时，推荐使用无菌生理盐水等等渗溶液稀释探针及阳性对照，以维持细胞正常状态。

5. 保存条件：试剂组分需于-20°C避光保存，并注意在有效期内使用。

6. 安全规范：本产品仅供科研使用，操作时需穿戴适当的个人防护装备。

六、相关产品推荐

1. 活性氧检测试剂盒(含稀释液)（货号：S0034）：提供预优化的探针及阳性对照稀释液，使用更为便捷，检测结果更稳定。

2. 细胞外液（货号：C0216）：专为探针稀释及细胞洗涤设计的等渗缓冲液，适用于本检测体系。

3. Hanks‘ Balanced Salt Solution（货号：C0218）：平衡盐溶液，可作为探针稀释与细胞洗涤的替代缓冲液。

4. 无菌生理盐水（货号：ST341）：0.9%氯化钠溶液，特别推荐用于细菌及酵母样品检测时的探针稀释。