一、基本信息
产品名称:CALNP™ mRNA in vitro 转染试剂
品牌:多纳生物
产品货号:DN002- 01/DN002- 05/DN002- 10
保存条件: 2~8℃保存一年
递送分子类型:信使RNA (mRNA)、环状RNA (circRNA)、单链向导RNA (sgRNA) 等多种RNA分子
细胞类型:适用于多种体外培养的哺乳动物细胞系
二、产品概述
CALNP™ mRNA in vitro 转染试剂是一种基于脂质纳米颗粒技术的非病毒递送系统,专门用于将多种RNA分子高效、低毒地导入哺乳动物细胞的细胞质中。该试剂操作简便,兼容含血清培养基,能够在转染后24-48小时内实现目的蛋白的高水平表达。
三、产品应用
△基因功能研究:通过递送编码特定蛋白的mRNA,在细胞中实现快速、瞬时的蛋白表达,用于研究基因功能。
△基因编辑:通过递送编码Cas9蛋白的mRNA及sgRNA,实现高效的CRISPR/Cas9基因编辑。
△蛋白生产:在细胞中快速表达重组蛋白或抗体,用于蛋白质研究或生产。
△RNA疗法研究:作为研究性工具,用于评估基于mRNA、环状RNA等新型RNA疗法的体外效果。
四、产品优势与特点
✅高转染效率:采用优化的脂质纳米颗粒配方,可高效包载并递送RNA进入多种细胞系,实现高水平的基因表达。
✅低细胞毒性:配方温和,对细胞生长状态影响小,有助于维持较高的细胞活力。
✅操作简便:无需更换为无血清或特殊优化培养基,可直接使用含血清和双抗的完全培养基进行复合物配制。
✅广泛兼容性:不仅适用于mRNA,还可有效转染环状RNA、sgRNA等多种类型的RNA分子。
✅灵活可调:用户可根据实验需求,通过调整各组分比例,灵活配制不同浓度和体积的转染复合物。
五、使用说明(概述)
1. 细胞铺板:建议在转染前24小时将细胞接种于培养板中,使其在转染时达到合适的汇合度(通常为50%-70%)。
2. 复合物配制:将Reagent A和Reagent B恢复至室温并涡旋混匀。在无菌离心管中,严格按照顺序依次加入mRNA溶液、Reagent A和Reagent B,混匀后室温静置孵育10分钟以形成复合物核心。
3. 复合物稀释:向上述孵育后的复合物核心中加入适量细胞完全培养基,轻轻混匀,即得到所需的mRNA转染复合液。
4. 复合物添加:将配制好的mRNA转染复合液直接均匀滴加到细胞培养孔中,轻轻摇晃培养板以确保混合均匀。
5. 细胞培养:将细胞置于37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养,通常在转染后24-48小时可检测到目的蛋白的表达高峰。
六、注意事项
1. 加样顺序:必须严格按照说明书指定的顺序(mRNA → Reagent A → Reagent B)进行混合,严禁先将mRNA或转染试剂与大量培养基混合,以免影响复合物形成效率。
2. 换液时间:加入转染复合液后的24小时内请勿更换培养基。若需延长培养时间,应在24小时后更换新鲜培养基以维持细胞营养。
3. 试剂保存:本品应在2-8°C条件下避光保存,运输可在常温下进行。
4. 浓度计算:请注意,最终加入细胞孔的mRNA终浓度约为所配制转染复合液中mRNA浓度的十分之一,需根据此比例进行实验设计。
七、相关产品推荐
1. CALNP™ RNAi in vitro (DN001)
2. E-Poly™ DNA/RNA转染试剂 (DN005)
3. CALNP™ RNAi HTS 转染试剂 (DN003)