一、基本信息
产品编号:BMU102-CN
规格:100 mL/500 mL
保存温度:4℃避光保存
产品描述:SuperKine™超敏型ECL发光液(飞克级)是一种即用型化学发光底物溶液,专为Western Blot(WB)和免疫沉淀(IP)等实验中的高灵敏度蛋白检测而设计。该产品基于优化的鲁米诺化学发光体系,能够检测固定在硝酸纤维素膜(NC膜)或聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)上低至飞克(fg)水平的微量靶蛋白。
二、产品应用
SuperKine™超敏型ECL发光液(飞克级)主要用于基于辣根过氧化物酶(HRP)标记的免疫检测实验。
△Western Blot检测:用于检测经电泳分离并转印至固相膜上的特异性蛋白。
△免疫印迹显色:作为HRP酶促化学发光反应的底物,产生可被X光胶片或化学发光成像仪捕获的光信号。
△低丰度蛋白分析:特别适用于信号微弱或表达量极低的靶蛋白检测。
三、产品优势
✅超高灵敏度:添加了独特的信号增强组分,可稳定检测低至飞克级的微量蛋白,显著提升低丰度蛋白的检出率。
✅长效信号稳定:产生的化学发光信号强烈且持续时间长达数小时,为多次曝光或延迟成像提供了充足的时间窗口。
✅操作流程简便:试剂为即用型溶液,并含有有助于稳定稀释后抗体的组分,简化了实验流程。
✅广泛膜兼容性:与实验室常用的NC膜和PVDF膜均具有良好的兼容性,无需针对不同膜材优化条件。
✅优异储存稳定性:在4℃避光条件下可稳定保存长达两年,性能保持一致。
✅通用检测方式:产生的光信号兼容传统的X光胶片压片法和现代化学发光成像仪直接采集。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 实验准备:完成蛋白样品电泳、转膜、封闭及HRP标记一抗/二抗孵育与洗涤等标准Western Blot前期步骤。
2. 工作液配制:临用前,将A液与B液按1:1体积比等量混合,轻柔涡旋或吹打混匀,配制发光工作液。
3. 工作液用量:根据膜面积估算用量,推荐按每平方厘米膜面积使用0.1-0.2 mL工作液的比例进行滴加。
4. 底物孵育:将新鲜配制的发光工作液均匀滴加至覆盖目标膜区域,在室温下避光孵育1至5分钟。
5. 多余液去除:使用洁净镊子夹取膜边缘,使其下缘轻轻接触滤纸以吸除膜表面残留的多余工作液。
6. 信号采集:立即用透明保鲜膜包裹印迹膜,置于暗盒中进行X光胶片曝光,或使用化学发光成像仪直接采集图像。
五、注意事项
1. 组分专一性:严禁将不同生产批次或不同品牌的ECL试剂组分混合使用,以免导致背景升高或信号异常。
2. 条件优化:为获得最佳信噪比,建议用户根据具体样本优化上样量、抗体稀释度、封闭条件及曝光时间。
3. 避免交叉污染:吸取A液和B液时必须更换移液器吸头,防止两组分相互污染导致试剂失效。
4. 最佳成像时机:虽然发光信号持久,但建议在孵育工作液后30分钟内进行压片或成像,此时信号强度通常最佳。
5. 试剂保存:使用后立即盖紧瓶盖,特别是含有不稳定氧化剂的B液,建议大包装产品分装保存以减少与空气接触。
6. 防止过曝:若出现中心信号过强反白现象,提示靶蛋白丰度过高或HRP浓度过高,应降低上样量、抗体浓度或缩短曝光时间。
六、相关产品推荐
1. SuperKine™增强型ECL发光液(皮克级)(货号:BMU101-CN):适用于常规及中高丰度蛋白检测的增强型化学发光底物。
2. SuperKine™增强型抗体稀释液(货号:BMU103-CN):专为抗体稀释设计,能稳定抗体活性并有助于降低背景。