一、基本信息

产品编号：C009-2-1

产品组分：谷丙转氨酶基质液，2,4—二硝基苯肼液，4mol/L氢氧化钠液，2mmol/mL丙酮酸钠标准液，0.1mol/L磷酸盐缓冲液

产品描述：本试剂盒基于赖氏法原理，用于定量检测血清、血浆、组织或细胞样本中的谷丙转氨酶（ALT）活性。其原理为ALT催化底物反应生成丙酮酸，后者与2,4-二硝基苯肼反应生成苯腙，在碱性条件下呈红棕色，于505nm波长处测定吸光度，通过标准曲线计算酶活力，结果以卡门氏单位报告。

二、产品应用

本谷丙转氨酶（ALT）检测试剂盒适用于多种样本类型的酶活力分析。

△肝功能和疾病研究：评估肝脏损伤程度，辅助诊断肝炎、肝硬化等疾病。

△药物毒理学研究：监测药物或化合物对肝脏的潜在毒性作用。

△基础生命科学研究：在细胞生物学、动物模型研究中分析细胞活力与代谢状态。

三、产品优势

✅方法经典：采用经过充分验证的赖氏（Reitman-Frankel）法，结果以卡门氏单位报告，准确可靠。

✅灵敏度高：优化的反应体系能够有效检测样本中微量的ALT活性变化。

✅操作简便：试剂即用型与临用配制相结合，流程清晰，适用于手工或半自动化操作。

✅样本兼容性广：适用于血清、血浆、组织匀浆及细胞裂解液等多种生物样本。

✅稳定性佳：核心组分在建议条件下保存，有效期可达6个月。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样本制备：液体样本可直接检测；组织样本需制备成10%匀浆后离心取上清；细胞样本需匀浆破碎。

2. 试剂配制：临用前将试剂三按比例稀释，配制所需体积的0.4mol/L氢氧化钠溶液。

3. 加样与孵育：依次向测定孔与对照孔中加入基质液和样本，于37℃精确孵育30分钟。

4. 终止与显色：孵育结束后加入2,4-二硝基苯肼液终止反应并启动显色反应，室温静置20分钟。

5. 碱化与测定：加入0.4mol/L氢氧化钠溶液，混匀后于505nm波长下测定各孔吸光度值。

6. 计算分析：利用丙酮酸钠标准品制作标准曲线，将样本吸光度值代入，计算ALT酶活力。

五、注意事项

1. 样本保存：血清中ALT活性在25℃可稳定2天，0-4℃可稳定一周，长期保存建议置于-25℃或更低温度。

2. 线性范围：当样本酶活力超过150卡门氏单位时，应使用生理盐水适当稀释后重新测定，以确保结果在线性范围内。

3. 对照设置：常规血清样本的内源性酮酸含量低，其对照孔吸光度接近试剂空白时，可用双蒸水替代血清设置对照。

4. 质量控制：建议将常规血清对照孔的吸光度值纳入实验室日常质控监控体系。

5. 标准曲线：每次实验或更换试剂批号时，建议重新制作标准曲线，以保证定量准确性。

六、相关产品推荐

1. 谷草转氨酶（AST）检测试剂盒（货号：C010-2-1）：用于检测血清、组织或细胞样本中的谷草转氨酶活性，常与ALT联用评估肝功能。

2. 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒（货号：A020-2-2）：用于定量检测细胞培养上清液或组织匀浆中的乳酸脱氢酶活性，作为细胞毒性或损伤的标志物。

3. BCA蛋白浓度测定试剂盒（货号：A045-3-2）：用于准确测定组织匀浆或细胞裂解液中的总蛋白浓度，为酶活力计算提供标准化依据。