一、基本信息
产品编号:354253
规格:100mL
保存温度:2-8°C
产品描述:Corning Cell Recovery Solution是一种专用于从Corning Matrigel Matrix中温和回收细胞的试剂。它通过低温(2-8°C)物理性解聚Matrigel基质,避免了酶消化或高温孵育对细胞表面蛋白的潜在损伤,从而确保回收的细胞适用于后续的分子生物学分析(如RNA或蛋白质提取)或重新培养。
二、产品应用
Corning Cell Recovery Solution 主要用于从三维Matrigel基质中回收细胞,适用于多种下游分析。
△细胞回收:从Corning Matrigel Matrix中温和解离并收集细胞。
△下游分子分析:为RNA提取、蛋白质分离等生化分析提供高质量的细胞样本。
△细胞再培养:在无菌操作下,回收的细胞可重新接种于其他细胞外基质进行后续培养。
△特定细胞类型应用:经验证可用于原代肝细胞、平滑肌细胞等多种细胞类型的研究。
三、产品优势
✅温和解聚:在2-8°C低温条件下物理性解聚Matrigel,无需蛋白酶消化,最大限度保护细胞完整性。
✅保持细胞表型:避免了酶消化对细胞表面受体和粘附分子的切割,减少了细胞生化特性的改变。
✅操作简便:流程标准化,解聚过程可预测(约60分钟),具有高度可重复性。
✅适用性广:回收的细胞既可用于分子生物学实验,在无菌条件下也可用于再培养。
四、使用说明(实验流程概要)
1. 清洗:移除培养基,使用预冷的PBS清洗Matrigel上的细胞层三次。
2. 加解聚液:向培养皿中加入适量Corning Cell Recovery Solution(例如,35mm培养皿加2mL)。
3. 收集:用细胞刮将细胞-凝胶复合物刮下,转移至置于冰上的预冷离心管中。
4. 冲洗转移:使用少量解聚液冲洗培养皿,并将冲洗液合并至离心管。
5. 解聚孵育:轻轻颠倒混匀离心管数次,随后置于冰上孵育约1小时,或直至Matrigel完全溶解,期间可轻摇以加速过程。
6. 离心收集:在2-8°C条件下,以200-300 x g离心5分钟,使细胞沉淀。
7. 清洗细胞:用预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀,并离心洗涤两次。
8. 后续处理:将细胞沉淀用于RNA或蛋白提取,或在无菌条件下进行重新铺板培养。
五、注意事项
1. 温度控制:整个解聚过程需在冰上或2-8°C环境下进行,以确保试剂活性和细胞活性。
2. 无菌操作:若计划将回收的细胞进行再培养,所有步骤必须在无菌条件下完成。
3. 轻柔操作:在解聚过程中避免用移液器吹打凝胶-细胞混合物,以防机械损伤细胞。
4. 储存条件:本品应储存于2-8°C,切勿冷冻,以保持试剂稳定性。
5. 替代方案:当实验需要获得高分散度的单细胞悬液用于精确计数或克隆培养时,可考虑使用Dispase等酶解试剂作为替代。
六、相关产品推荐
1. Corning Matrigel Matrix(货号:356234):用于建立三维细胞培养模型,模拟体内细胞外基质环境。
2. Phosphate buffered saline (PBS)(货号:21-040-CV)