一、基本信息

产品名称：jetPRIME®转染试剂

品牌：Polyplus-transfection®

规格：0.1 mL(SKU：101000027)/0.75 mL(SKU：101000015)/1.5mL(SKU：101000046)/5×1.5mL(SKU：101000001)

产品组分：jetPRIME®转染试剂，jetPRIME®缓冲液

递送分子类型：DNA质粒，siRNA

细胞类型：哺乳动物细胞系

二、产品概述

jetPRIME®是一种基于聚合物的转染试剂，专为高效、可重复地将DNA和siRNA递送至哺乳动物细胞而设计。该试剂在多种细胞系中均表现出卓越的转染性能，所需核酸量少，细胞毒性低，是进行基因功能研究、蛋白质表达和基因沉默实验的理想工具。

三、产品应用

△基因表达研究：用于将报告基因或目的基因的表达质粒瞬时转染至细胞，以研究基因功能或蛋白质表达。

△基因沉默研究：用于将siRNA高效递送至细胞质，实现靶向基因的特异性敲低，用于功能缺失性研究。

△CRISPR/Cas9基因组编辑：适用于递送CRISPR/Cas9系统组分，包括编码Cas9和gRNA的质粒或gRNA分子，以进行基因敲除、敲入等编辑操作。

△共转染实验：支持将DNA质粒与siRNA同时转染至同一细胞，用于研究基因过表达与敲低的协同效应或进行复杂的遗传操作。

△稳定细胞系构建：通过转染携带筛选标记的质粒并施加抗生素压力，可用于筛选获得稳定表达外源基因的细胞系。

四、产品优势与特点

✅高效广谱：在广泛的哺乳动物细胞系中均能实现高转染效率，包括部分难转染细胞。

✅低细胞毒性：优化的聚合物配方在保证高效递送的同时，对细胞生长影响极小。

✅操作简便：转染复合物制备步骤简单快速，室温孵育10-15分钟即可使用。

✅血清兼容性：转染过程可在含血清的完全培养基中直接进行，无需更换为无血清培养基，简化流程并有利于细胞健康。

✅核酸节省：每次转染仅需微克级DNA或纳摩尔级siRNA，有效节约珍贵的核酸样品。

五、使用说明（概述）

以下为基于6孔板规格的瞬时DNA转染标准操作步骤概述：

1. 细胞准备：在转染前约24小时，以每孔约2×10^5个细胞的密度接种细胞，使转染时细胞融合度达到60%-80%。

2. 稀释核酸：将2 µg质粒DNA稀释于200 µL jetPRIME®缓冲液中，涡旋混匀。

3. 试剂准备：使用前涡旋jetPRIME®试剂5秒，并短暂离心。

4. 形成复合物：向DNA稀释液中加入4 µL jetPRIME®试剂，涡旋混匀1秒，室温静置孵育10分钟。

5. 添加复合物：将200 µL转染复合物逐滴加入含完全培养基的细胞培养孔中，轻轻晃动培养板使其分布均匀。

6. 培养细胞：将培养板置于37°C，5% CO2培养箱中继续培养。

7. 换液与分析：转染后4-24小时可更换新鲜培养基，通常在转染后24-72小时分析基因表达情况。

六、注意事项

1. 细胞状态：使用处于对数生长期、状态良好的细胞进行转染，接种密度需根据培养容器规格进行优化。

2. 核酸质量：推荐使用高纯度、无菌的质粒DNA，浓度建议在0.3-1 µg/µL之间，以获得最佳转染效果。

3. 缓冲液使用：务必使用试剂盒提供的专用jetPRIME®缓冲液稀释核酸，不可用水或其他缓冲液替代。

4. 血清条件：转染时培养基中需含有血清，该试剂在血清存在下效率更高。

5. 复合物孵育：转染复合物配制后，应在室温下孵育10-15分钟，时间不足或过长均可能影响转染效率。

6. 比例优化：对于难转染细胞或特殊应用，建议根据产品说明书中的优化指南，对jetPRIME®试剂与DNA的比例进行微调。

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