一、基本信息

产品名称：PEI转染试剂MW25000(PEI 25K)

产品货号：23966-1 / 23966-100

规格：1g / 100 mg

递送分子类型：质粒DNA

细胞类型：适用于多种贴壁细胞（如HEK293T）及悬浮细胞

二、产品概述

本产品为线性聚乙烯亚胺（PEI，分子量25，000），是一种高效、经济的阳离子聚合物转染试剂。其通过静电作用与带负电的核酸形成复合物，促进细胞内存取和内涵体逃逸，广泛用于多种哺乳动物细胞的瞬时DNA转染，特别适用于大规模蛋白表达和病毒包装。

三、产品应用

△蛋白瞬时表达：用于在哺乳动物细胞中快速、高水平地表达重组蛋白。

△病毒包装生产：作为辅助质粒的转染试剂，用于生产慢病毒、腺相关病毒等病毒载体。

△基因功能研究：通过转染过表达或干扰质粒，用于研究特定基因在细胞中的功能。

△报告基因检测：转染含有报告基因（如荧光蛋白、荧光素酶）的质粒，用于检测启动子活性或信号通路。

四、产品优势与特点

✅高转染效率：对多种难转染细胞系，尤其是悬浮细胞，表现出良好的转染性能。

✅成本效益：相较于商业化的脂质体转染试剂，具有显著的成本优势，适合大规模实验。

✅稳定性好：配制好的工作液在4°C避光条件下可稳定保存数月。

✅适用性广：适用于从研究级到生产级的不同规模的细胞培养容器。

五、使用说明（概述）

以下为基于6孔板贴壁细胞（如HEK293T）的瞬时DNA转染通用方案概述：

1. 细胞铺板：转染前约24小时，将处于对数生长期的细胞以适宜密度（例如2×10^6细胞/孔）接种于6孔板中。

2. 复合物制备：分别用无血清培养基稀释质粒DNA与PEI工作液，随后将PEI稀释液加入DNA稀释液中，轻柔吹打混匀。

3. 孵育：将混合液在室温静置孵育20-30分钟，以形成稳定的PEI-DNA转染复合物。

4. 细胞加样：将孵育好的转染复合物逐滴均匀加入已更换为新鲜培养基的细胞培养孔中。

5. 培养换液：将细胞培养板置于37°C、5% CO2培养箱中培养，通常于转染后4-6小时或次日更换为完全培养基。

6. 检测分析：在转染后24-72小时，根据实验目的收集细胞或上清，进行蛋白表达、报告基因活性等检测。

六、注意事项

1. 优化必要性：初次使用或更换细胞/质粒体系时，必须优化DNA与PEI的质量比（通常范围在1:1至1:5），以获得最佳转染效率。

2. 试剂溶解：配制PEI储存液时，需确保粉末完全溶解，溶解不彻底会严重影响转染复合物的形成及转染效果。

3. 细胞状态：使用处于对数生长期、活力高且传代次数适宜的细胞进行转染，是获得高转染效率的关键前提。

4. 无菌操作：整个转染复合物制备过程需在无菌环境下进行，PEI工作液需经0.22 μm滤膜过滤除菌。

5. 毒性控制：过高的PEI浓度或过长的复合物暴露时间可能对细胞产生毒性，需通过预实验确定合适的处理条件。

七、相关产品推荐

1. PEI MAX 转染试剂（货号：24765）

2. Transporter 5® Transfection Reagent（货号：26008）

3. Transporter 5® + AmpliFect™ Transfection Kit（货号：14415）