一、基本信息
产品名称:D萤光素钾盐(D-Luciferin, Potassium Salt)
产品货号:LUCK-1G/LUCK-100
规格:1g/100mg
保存温度:-20°C避光保存
产品介绍:D-荧光素钾盐是一种高纯度、水溶性的底物,专用于对活细胞及动物模型中的萤火虫荧光素酶活性进行生物发光成像。
三、产品应用
本产品萤火虫萤光素(D-Luciferin)是进行萤光素酶报告基因检测的核心底物,主要应用于以下领域:
△报告基因检测:作为萤火虫萤光素酶的专用底物,用于检测报告基因的转录活性。
△基因表达研究:通过定量发光信号,分析特定启动子或增强子的活性。
△高通量筛选:适用于96孔或384孔板格式,用于药物筛选或功能基因组学研究。
△细胞信号通路分析:通过报告基因构建体,研究细胞内信号转导事件。
四、产品优势
✅高灵敏度:萤火虫萤光素酶反应可产生极低背景的光信号,实现对低丰度表达的精确检测。
✅快速检测:底物加入后发光反应迅速启动,峰值在亚秒级内达到,适合快速读数。
✅线性范围宽:在优化条件下,发光信号与酶浓度在一定范围内呈良好线性关系,便于准确定量。
✅系统兼容性:提供的配套缓冲液配方(如含辅酶A的TMCA缓冲液)可稳定发光信号,延长半衰期,提升检测重复性。
五、使用说明(体外成像操作概要)
1. 试剂配制:使用去离子水或指定缓冲液溶解萤光素粉末,制备浓度为15 mg/mL的100X储备溶液(GLSS)。
2. 工作液制备:将TMCA缓冲液各组分按比例混合,制备萤光素酶测定反应缓冲液,其中可加入辅酶A以稳定发光信号。
3. 样品处理:使用适当的细胞裂解缓冲液处理表达萤光素酶的哺乳动物细胞、酵母或细菌细胞,获得含有目标蛋白的细胞裂解上清液。
4. 测定操作:将细胞裂解样品与含有萤光素底物的工作液混合,立即使用发光计检测产生的化学发光信号。
5. 数据分析:根据标准曲线或对照样品,将测得的相对光单位(RLU)值转换为荧光素酶的相对活性或浓度。
六、注意事项
1. 储存条件:萤光素固体粉末及储备液均需-20°C避光保存,以保持其化学稳定性。
2. 溶液稳定性:配制好的萤光素储备液建议分装保存,避免反复冻融,并在规定时间内使用完毕。
3. 底物浓度:在最终反应体系中,萤光素工作浓度建议为150 μg/mL,以确保反应底物饱和。
4. 信号衰减:标准反应发光信号衰减较快,使用含辅酶A的缓冲液可有效延长信号稳定时间。
5. 仪器校准:在正式实验前,建议使用系列稀释的荧光素酶标准品建立校准曲线,确定发光计的线性检测范围。
七、相关产品推荐
1. D-Luciferin, Sodium Salt(货号:LUCNA-100)
2. D-Luciferin, Potassium Salt (Endotoxin Free)(货号:eLUCK-100)
3. D-Luciferin Firefly, free acid(货号:L-123-250)