一、基本信息
产品名称:Neptry胰酶消化液
产品货号:BM16013
规格:100 mL,500 mL
保存温度:2-8°C避光保存
二、产品介绍
Neptry胰酶是一种通过大肠杆菌重组表达并纯化获得的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶,其序列来源于尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。该酶特异性切割精氨酸和赖氨酸羧基端的肽键,其酶切特性与最适pH范围(7.0-7.4)与传统胰蛋白酶一致。本品为即用型消化液,适用于贴壁哺乳动物细胞的解离,具有解离效率高、细胞毒性低的特点,且产品纯度与稳定性优于动物源性胰蛋白酶。
三、产品应用
Neptry胰酶主要用于贴壁培养细胞的消化解离,具体应用包括:
△原代细胞分离:用于组织块的酶学消化,以获取原代细胞。
△细胞传代:用于常规贴壁培养细胞的消化传代。
△微载体培养:用于微载体上贴壁生长细胞的收获。
四、产品优势
✅高纯度:经尺寸排阻色谱分析,纯度高于95%,宿主蛋白残留低于10 PPM,杂质含量低。
✅高比活:比活性大于27,000 U/mg,酶切效率高,细胞解离快速。
✅低内毒素:细菌内毒素含量低于5 EU/mL,符合细胞培养应用的严格要求。
✅低细胞毒性:经细胞实验验证,其解离动力学与猪胰蛋白酶相似,同时对细胞损伤更小。
✅稳定性佳:在2-8°C避光条件下可稳定保存24个月,活性保持优异。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 准备:移去细胞培养瓶中的完全培养基。
2. 洗涤:加入适量PBS缓冲液轻柔洗涤细胞层一次,然后弃去PBS。
3. 消化:加入适量Neptry胰酶消化液(如T25瓶建议加1.7mL),于37℃孵育约3分钟。
4. 中和:加入含血清的完全培养基(体积约为胰酶量的5倍)以中和酶活性。
5. 重悬:轻柔吹打培养瓶底面,使细胞完全分散形成单细胞悬液。
6. 计数与传代:对细胞悬液进行计数与活率分析,按所需密度接种至新的培养容器中。
六、注意事项
1. 储存:本品需于2-8°C避光保存,切勿冷冻,以免影响酶活性。
2. 解离时间:具体的消化时间需根据细胞类型和密度进行优化,避免过度消化。
3. 中和:消化后需及时加入含血清的培养基或胰酶抑制剂以终止反应。
4. 无菌操作:整个操作过程应在无菌环境下进行,避免微生物污染。
5. 安全:本品仅供科研使用,操作时请遵循实验室生物安全规范。
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