一、基本信息
产品名称:TRAP/ALP染色试剂盒(病理研究用)
产品货号:294-67001
规格:60Tests
保存温度:未开封前于-20℃保存
二、产品介绍
本试剂盒基于抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和碱性磷酸酶(ALP)的酶活性,用于骨组织切片或培养细胞中破骨细胞与成骨细胞的染色与观察。TRAP和ALP分别是破骨细胞和成骨细胞的特异性标志酶,通过双染色技术可同步评估骨细胞的分化状态与空间分布,为骨代谢研究及相关疾病模型分析提供有力工具。
三、产品应用
本TRAP/ALP染色试剂盒主要用于骨生物学研究中的细胞鉴定与组织学分析。
△骨组织切片分析:适用于甲基丙烯酸乙二醇酯(GMA)包埋的非脱钙骨薄切片染色。
△培养细胞鉴定:用于体外培养的破骨细胞与成骨细胞的酶活性染色与鉴定。
△骨代谢研究:通过可视化破骨细胞与成骨细胞的活性与分布,研究骨重塑平衡。
△疾病模型评估:在骨质疏松等骨代谢疾病动物或细胞模型中,评估骨吸收与骨形成状态。
四、产品优势
✅操作简便:TRAP染色底物仅需三液混合配制,ALP底物为预混液,简化了操作流程。
✅双重染色:可实现单一样本中TRAP(红紫色)与ALP(蓝褐色)活性的同步染色与区分。
✅应用广泛:兼容GMA树脂包埋的骨组织切片与培养细胞样本,适用性广。
✅结果清晰:染色对比鲜明,便于在显微镜下清晰观察与区分两种细胞类型。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样本准备:将GMA包埋的非脱钙骨薄切片样本置于硅烷化载玻片上,用水漂洗。
2. 溶液配制:使用前即时配制TRAP染色工作液,配制后请勿储存。
3. TRAP染色:在湿盒中,每张切片滴加0.5 mL TRAP染色工作液,室温孵育30分钟。
4. ALP染色:在湿盒中,每张切片滴加0.5 mL预混ALP底物溶液,室温孵育30分钟。
5. 核复染:将切片浸入盛有蒸馏水的染缸,滴加核染液复染4-5秒后立即用蒸馏水漂洗。
6. 观察封片:37℃加热板干燥切片,二甲苯透明,最后用封片剂封片并进行镜检。
六、注意事项
1. 储存条件:开封后,试剂(1)、(2)、(3)需于-20℃保存;试剂(4)、(5)需于2-10℃保存,使用前请轻微摇匀。
2. 溶液稳定性:TRAP染色工作液需现配现用,配制后不宜保存。
3. 染色控制:核复染时间需严格控制,避免过度染色影响观察。
4. 样本处理:用于染色的骨组织建议采用GMA树脂包埋且不脱钙,以获得最佳染色效果。
5. 有效期:产品有效期为生产日期起24个月,具体日期见标签。
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