一、基本信息

产品编号：B0004D

核心特点：快速、高效、室温操作、基因组DNA去除

产品描述：EZ-press RNA Purification Kit是一款基于离心柱技术的RNA提取试剂盒，专为从哺乳动物细胞中快速纯化高质量总RNA而设计。该试剂盒包含优化的裂解系统和膜结合技术，可在室温下高效裂解细胞并特异性结合RNA，同时通过柱上DNA酶消化步骤有效去除基因组DNA污染，洗脱得到的RNA适用于下游多种分子生物学应用。

二、产品应用

EZ-press RNA Purification Kit适用于从多种哺乳动物细胞样品中快速提取高纯度总RNA。

△ 基因表达分析：纯化的RNA适用于RT-qPCR、RT-PCR等反转录反应。

△ 高通量测序：获得的RNA完整性好，可用于RNA-seq等测序文库构建。

△ 分子克隆：为cDNA文库构建、Northern印迹等实验提供高质量的RNA模板。

△ 细胞生物学研究：从贴壁细胞、悬浮细胞及免疫细胞（如T细胞、B细胞）中提取RNA。

三、产品优势

✅ 操作便捷：整个提取流程在室温下进行，无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂，步骤精简。

✅ 高效去基因组：试剂盒提供gDNA Remover，可在离心柱膜上直接进行DNA酶消化，有效去除基因组DNA残留。

✅ 高纯度产出：优化的结合与洗涤体系能有效去除蛋白质、盐分等杂质，获得高纯度的RNA。

✅ 灵活兼容：适用于不同培养规格的细胞样品（如6孔板、35mm培养皿），并对裂解产物提供-80°C冻存选项，便于实验安排。

✅ 快速完成：从细胞裂解到RNA洗脱，可在约15分钟内完成单个或多个样品的处理。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 样品裂解：对于贴壁细胞，弃培养基并用PBS清洗后，直接加入裂解液于培养器皿中裂解；对于悬浮细胞或消化后的贴壁细胞，离心收集细胞沉淀后加入裂解液重悬裂解。

2. 乙醇混合：向充分裂解的样品中加入等体积无水乙醇，立即吹打混匀。

3. 过柱结合：将混合物转移至RNA纯化柱，离心使RNA特异性结合于硅胶膜。

4. 柱上消化：将配置好的DNA酶混合液直接加入纯化柱中央的膜上，室温静置进行基因组DNA消化。

5. 洗涤：向纯化柱中加入洗涤缓冲液，离心以去除残留的酶、盐及有机杂质。

6. RNA洗脱：将纯化柱开盖晾干后，向膜中央加入适量无核酸酶洗脱缓冲液，静置后离心收集高纯度RNA溶液。

五、注意事项

1. 缓冲液配制：Wash Buffer首次使用前必须按说明书要求加入指定体积的无水乙醇并混匀，否则影响洗涤效果。

2. 防止污染：建议将Elution Buffer进行小份分装后使用，以避免反复冻融或取用导致的核酸酶污染。

3. 操作温度：全部提取步骤应在室温下完成，切勿将裂解混合物或装有样品的纯化柱置于冰上，以防盐析出导致柱堵塞。

4. 样品准备：推荐使用密度高于80%的细胞进行提取，对于大面积培养的细胞（如100mm培养皿），建议消化后收集细胞沉淀再裂解，以确保裂解充分并防止纯化柱堵塞。

5. 裂解技巧：裂解时调整移液器量程进行温和吹打，避免产生过多气泡，以确保裂解效率。裂解产物可于-80°C长期保存，后续恢复至室温并补加乙醇后即可继续纯化流程。

6. 洗脱操作：洗脱时必须将洗脱液准确加至纯化柱膜的中央区域，并避免枪头触碰损伤滤膜，以确保RNA被充分溶解洗脱。

六、相关产品推荐

1. Tissue RNA Purification Kit PLUS（EZB-RN001-plus）：适用于从动物组织和细胞中提取高质量的总RNA。

2. Tissue RNA Purification Kit (for Adipose Tissue) （EZB-RN001A）：专门针对高脂肪、高蛋白等难处理动物组织进行优化，有效去除脂质干扰，获得更高纯度的RNA。