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一、基本信息
产品编号：EZB-RN4
规格：100次反应 (100 Preps)
技术原理：基于酚/异硫氰酸胍的样品裂解与硅胶膜离心柱纯化相结合的技术。Buffer A可替代传统的氯仿进行相分离。
储存条件：裂解缓冲液(Lysis Buffer)和Buffer A需2~8°C避光保存。其他组分（洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、离心柱）可室温保存。建议将洗脱缓冲液分装保存，以避免污染。
二、产品应用
本试剂盒专为从动物组织和培养细胞中快速提取高质量总RNA而设计。纯化的RNA完整性好，无基因组DNA和蛋白污染，适用于各种对RNA质量要求苛刻的下游应用：
· 逆转录PCR (RT-PCR)
· 实时荧光定量逆转录PCR (RT-qPCR)
· 下一代测序 (RNA-Seq)
· Northern Blotting
· Poly A+ mRNA 筛选
· 微阵列分析 (Microarray analysis)
· 长链非编码RNA (lncRNA) 研究
三、产品优势
1. 高质量与高得率：
试剂盒内含的裂解缓冲能立即灭活RNase，确保获得完整的RNA。与传统TRIzol法相比，在相同样本量下能获得更高的RNA产量（见图1实验结果）。
2. 安全便捷：
提供的 Buffer A 可有效替代有毒的氯仿 进行相分离，实验操作更安全，减少了有害试剂的使用。
3. 广泛兼容性：
适用于多种动物组织和培养细胞，并能有效提取lncRNA（见图2实验结果），满足多种前沿研究需求。
4. 快速纯化：
流程集成了高效的相分离和硅胶膜纯化，可在短时间内获得即用型的高纯度RNA。
5. 即用型试剂：
提供的洗涤缓冲液浓缩液，只需加入指定量的无水乙醇即可使用，方便保存和取用。
四、使用说明（流程概要）
1. 裂解：
在适量Lysis Buffer中裂解并匀浆组织或细胞样本。
2. 相分离：
向匀浆液中加入Buffer A，充分混匀后离心，样本将分离为有机相、中间层和无色的水相（含RNA）。
3. RNA结合：
小心吸取上层的含RNA水相，加入无水乙醇混匀，然后将混合液转移到RNA纯化柱中，离心使RNA结合到硅胶膜上。
4. 洗涤：
依次使用添加了乙醇的Wash Buffer 1和Wash Buffer 2离心洗涤纯化柱，彻底去除杂质。
5. 洗脱：
将纯化柱置于新的无RNase收集管中，向膜中央加入Elution Buffer，离心洗脱即可得到高纯度RNA。
五、注意事项
1. RNase污染：
整个操作过程应佩戴手套，使用无RNase的枪头和离心管，以防止RNA降解。
2. 试剂准备：
首次使用前，务必记得向Wash Buffer 1和Wash Buffer 2浓缩液中分别加入52 ml 100%的无水乙醇，并做好标记。
3. 相分离：
吸取上清（水相）时务必小心，切勿吸到中间层的白色界面或下层有机相，否则会导致基因组DNA污染和蛋白质污染。
4. 样本量：
处理组织样本时，推荐用量为30mg，请勿超过说明书建议的最大样本量，以确保完全裂解和最佳得率。
5. 储存：
配制好的洗涤缓冲液（含乙醇）可室温密封保存。提取的RNA如需长期保存，建议置于-70°C。
六、相关产品推荐
Cell Total RNA Isolation Kit (细胞总RNA提取试剂盒)：如果您主要处理的是培养细胞样本，可选择EZBioscience专为细胞优化的快速提取试剂盒。
Blood Total RNA Extraction Kit (血液总RNA提取试剂盒)：对于全血、血清/血浆等特殊样本，推荐使用针对血液样本优化的专用试剂盒，以有效克服抑制剂问题。
gDNA Remover (基因组DNA去除剂)：如果您下游应用对DNA残留极度敏感（如qPCR），可在提取后使用DNase I进行处理，或选择带有on-column DNase Digestion步骤的RNA提取试剂盒。
First Strand cDNA Synthesis Kit (第一链cDNA合成试剂盒)：提取高质量RNA后，可使用EZBioscience高效的逆转录试剂盒进行cDNA合成，完美衔接下游PCR或qPCR实验。
