一、基本信息                                                             
  产品编号：125-05061 
  规格：20 μg × 5 管
  产品等级：质谱级 (Mass Spectrometry Grade)
  来源：细菌（经细菌分类学鉴定，来源菌现为产酶溶杆菌, Lysobacter enzymogenes）
  外观：白色冻干粉（内含约10%的 2 mmol/L Tris-HCl 缓冲液，pH 8.0）
  活性：0.03 ~ 0.07 AU/vial (酰胺酶活性单位/管)
  分子量：27,000 (凝胶过滤法) / 30,000 (SDS-PAGE法)
  保存条件：-20°C，避光保存

二、产品应用                                                             

本品是一种高特异性的蛋白水解酶，主要用于蛋白质组学和生物化学研究中的蛋白质样品处理。

· 蛋白质组学分析：作为质谱(MS)分析前处理的关键工具，用于将蛋白质酶解成肽段，特别适用于基于MALDI-TOF MS或LC-MS/MS的蛋白质鉴定和表征。

· 提高序列覆盖率：与胰蛋白酶(Trypsin)联用，可有效减少胰蛋白酶的漏切位点(Missed Cleavage)，增加可鉴定到的肽段数量，从而提高蛋白质的序列覆盖度和鉴定可信度。

· 蛋白质测序：用于蛋白质的Edman降解法测序分析。

· 酶法合成：用于催化合成 Lys-X 类化合物。

三、产品优势与特点                                                         

1. 极高的特异性：

严格特异性切割赖氨酸(Lys)残基的C末端肽键，几乎不产生非特异性切割。

2. 卓越的酶切效率：

漏切率极低（接近 0%），优于胰蛋白酶（漏切率约8%），能生成更多更完整的肽段。

3. 出色的稳定性：

酶活性非常稳定。在 4 M尿素 或 0.1% SDS 溶液中，于30°C孵育6小时后仍能保持完全活性，非常适合难溶蛋白或膜蛋白的酶解。

4. 广泛的pH耐受性：

  在pH 5.0-12.0的缓冲液中于4°C稳定；在pH 6.0-11.0下于30°C稳定，为实验条件提供了极大的灵活性。

5. 即用型小包装：

  采用20μg的小管包装设计，每管可处理100-200个凝胶样品，方便取用，避免反复冻融，保证酶活性和实验重现性。

6. 质谱级别纯度：

  经过严格纯化，不含其他蛋白酶杂质，有效避免样品降解，确保质谱结果背景清晰、准确可靠。

四、使用说明                                                             

1. 酶溶液的配制：

  推荐将1管（20 μg）冻干粉溶解于1 mL 50 mmol/L Tris-HCl (pH 8.5) 缓冲液中，轻轻涡旋溶解，即可得到工作液。溶解后的酶液可在4°C稳定保存。

2. 胶内酶切通用流程（摘要）：

  通过SDS-PAGE分离目标蛋白条带并切下凝胶块。

  使用乙腈脱水、还原（DTT）、烷基化（碘乙酰胺）等标准步骤对凝胶块中的蛋白进行预处理。

  除去缓冲液，加入适量稀释好的赖氨酰肽链内切酶工作液（足以覆盖凝胶块），在冰上孵育45分钟使其吸收。

  吸走多余酶液，加入少量新鲜缓冲液（如10 μL 50 mmol/L Tris-HCl, pH 8.5），于37°C孵育过夜。

  次日，使用缓冲液和有机相（如5%甲酸/50%乙腈）分步萃取肽段。

  对萃取液进行脱盐、浓缩等后处理后，进行质谱分析。

3. 与胰蛋白酶联用方案：
  可先使用本品进行预酶解，再加入胰蛋白酶进行共同或后续酶解，能显著改善酶切效果。

五、注意事项                                                             

1. 抑制剂：

本品是一种丝氨酸蛋白酶，可被DFP、PMSF、TLCK等丝氨酸蛋白酶抑制剂不可逆地抑制。在操作和配置溶液时需确保器皿和环境中无此类抑制剂污染。

2. 温度敏感性：

尽管在30°C下稳定，但超过50°C会迅速失活，切勿高温处理。

3. 溶解：

请使用推荐的缓冲液（如Tris-HCl, pH 8.5）进行溶解，避免使用含有抑制剂的溶液。

4. 实验器具：

进行胶内酶切等微量实验时，建议使用经聚硅酮处理过的离心管和吸头，以防止蛋白质/肽段非特异性吸附造成的损失。

5. 用途：

本产品仅供研究使用，不可用于人体或动物的临床诊断或治疗。

六、相关产品推荐                                                           

为满足不同的蛋白质组学研究需求，富士胶片和光提供一系列高质量的蛋白酶产品：

1. 胰蛋白酶 (Trypsin, MS Grade) [202-15951]：

猪胰腺来源的质谱级胰蛋白酶，特异性切割Lys和Arg的C端。与本品联用效果更佳。

2. 测序级Glu-C内切酶 (Endoproteinase Glu-C) [050-05941]：

特异性切割Glu和Asp的C端肽键（pH依赖），提供另一种酶切选择，用于复杂样品的多酶解策略。

3. 测序级Asp-N内切酶 (Endoproteinase Asp-N) [056-05921]：

特异性切割Asp的N端肽键，进一步增加蛋白质序列的覆盖度。

4. V8蛋白酶 (V8 Protease) [164-13982]：