一、基本信息

产品货号：D0312S / D0312M

规格：20次 / 100次

保存温度：-20°C

二、产品介绍

本试剂盒提供了一套优化的试剂配方与操作流程，用于高效制备枯草芽孢杆菌感受态细胞。其原理基于在特定培养基中诱导细胞进入感受态，并通过离子处理增加细胞膜通透性，从而提升外源DNA的摄取效率。适用于枯草芽孢杆菌168及其衍生菌株、WB800等多种常见菌株。

三、产品应用

本产品制备的枯草芽孢杆菌感受态细胞主要用于以下分子生物学操作：

△遗传转化：用于质粒DNA向枯草芽孢杆菌中的高效导入。

△异源蛋白表达：作为安全、高效的蛋白表达宿主系统。

△基因功能研究：通过基因敲除、互补等实验进行功能验证。

△代谢工程改造：对工业菌株进行遗传修饰以优化生产性能。

四、产品优势

✅广谱适用：适用于枯草芽孢杆菌168、WB800等多种常见菌株及衍生株。

✅高效制备：采用优化的培养基配方与诱导程序，可获得高转化效率的感受态细胞。

✅操作简便：提供预配制的核心试剂，简化了传统制备流程中的复杂步骤。

✅灵活保存：制备的感受态细胞可添加甘油于-80°C长期保存，方便多次使用。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：自备无菌水、LB培养基及平板，长期保存需自备45%无菌甘油。

2. 菌株活化：将保存菌株划线至相应抗性LB平板，37°C培养过夜以获得新鲜单克隆。

3. 种子培养：挑取单菌落接种至LB液体培养基，37°C振荡培养过夜（16-18小时）。

4. 培养基配制：使用试剂盒内组分，按指定比例配制培养基I和培养基II。

5. 感受态诱导：取适量过夜菌液转接至培养基I中培养至对数中期，再转至培养基II中诱导，最后加入试剂F处理。

6. 细胞收集：离心收集菌体，用保留的上清液重悬，即得感受态细胞悬液，可分装使用或添加甘油冻存。

六、注意事项

1. 无菌操作：全过程需严格遵循无菌操作规范，建议设立空白对照以防污染。

2. 菌株状态：必须使用新鲜活化的菌株，平板保存时间不宜超过一周，否则将显著影响转化效率。

3. 试剂使用：培养基I与II建议现用现配。试剂A于4°C储存可能析出结晶，可37°C水浴溶解后使用。

4. 安全规范：本产品仅限科研使用，操作人员需穿戴实验服与手套，并按规范处置生物废弃物。

七、相关产品推荐

1. 质粒小量抽提试剂盒(通用型)（货号：D00007）

2. LB培养基(不含抗生素)（货号：ST163）