一、基本信息

产品名称：细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒

产品货号：P0028

规格：100次

保存温度：-20°C

二、产品介绍

本试剂盒提供了一种基于渗透压差异原理，从培养细胞或新鲜组织中高效分离细胞核蛋白与细胞浆蛋白的标准化方法。该方法操作简便，可在约90分钟内完成，所获得的蛋白组分适用于多种后续分子生物学及生物化学分析。

三、产品应用

本细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒适用于从细胞或组织中分离亚细胞组分蛋白，用于相关研究。

△蛋白亚细胞定位研究：用于分析特定蛋白质在细胞浆或细胞核内的分布。

△转录调控分析：分离的核蛋白可用于凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）及核酸酶足迹实验（footprinting）等。

△报告基因检测：为基于转录因子活性的报告基因分析提供核蛋白样品。

△Western Blotting：为免疫印迹实验提供高纯度的胞浆及核蛋白样品。

△酶学分析：用于测定特定在细胞核或细胞浆中发挥功能的酶活性。

四、产品优势

✅高效分离：基于温和的低渗裂解与高盐提取原理，实现胞浆与核蛋白的高效分离，交叉污染低。

✅操作便捷：流程标准化，无需超速离心等特殊设备，可在约90分钟内完成主要步骤。

✅兼容性广：适用于多种培养细胞系及新鲜组织样本，应用范围广泛。

✅下游应用广：抽提所得蛋白兼容Western Blot、EMSA、酶活测定等多种下游分析技术。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 溶液配制：试剂室温溶解后置于冰上，使用前向细胞浆蛋白抽提试剂A和细胞核蛋白抽提试剂中分别加入PMSF至终浓度为1mM。

2. 样本制备：贴壁细胞建议使用细胞刮或EDTA非酶学方法收集；悬浮细胞用PBS洗涤后离心收集细胞沉淀。

3. 胞浆蛋白抽提：按比例向细胞沉淀中加入预冷的含PMSF的抽提试剂A，涡旋悬浮，冰浴后加入试剂B，涡旋离心后收集上清即为胞浆蛋白。

4. 核蛋白抽提：彻底吸尽上述离心管中的残余上清，向沉淀中加入含PMSF的核蛋白抽提试剂，间歇涡旋冰浴后离心，收集上清即为核蛋白。

5. 组织样本处理：新鲜组织需经机械匀浆预处理，后续流程与细胞样本的胞浆、核蛋白抽提步骤基本一致，注意试剂用量按组织重量比例调整。

六、注意事项

1. 蛋白酶抑制剂：必须自备PMSF，并确保在使用前即刻加入抽提试剂中，以防其在水溶液中快速失活。

2. 低温操作：整个抽提过程需在冰上或4°C环境下进行，以维持蛋白稳定性。

3. 样本要求：组织样本必须为新鲜样本，冻存组织抽提效率会显著下降。

4. 蛋白定量：推荐使用BCA法测定本试剂盒抽提所得蛋白的浓度，Bradford法可能不适用。

5. 上清吸取：吸取胞浆蛋白上清时需格外小心，避免触及细胞核沉淀，以防交叉污染。

6. 用途限定：本产品仅供科研使用，不可用于临床、食品、药品等领域。

七、相关产品推荐

1. PMSF（货号：ST506）

2. BCA蛋白浓度测定试剂盒（货号：P0009/P0010/P0010S）