一、基本信息
产品名称:Bradford蛋白浓度测定试剂盒
产品货号:P0006
规格:1000次
保存温度:4°C保存,一年有效;蛋白标准可于-20°C长期保存。
二、产品介绍
本试剂盒基于经典的Bradford法原理开发,通过考马斯亮蓝G-250在酸性条件下与蛋白质结合产生颜色变化,于595nm处测定吸光度以定量蛋白浓度。该试剂盒经过优化,实现了快速、高灵敏度的检测,在指定浓度范围内具有良好的线性关系,适用于常规实验室的蛋白质定量分析。
三、产品应用
Bradford蛋白浓度测定试剂盒广泛应用于生命科学研究中需要对蛋白质溶液进行快速定量的场景。
△总蛋白定量:用于测定细胞裂解液、组织匀浆液、纯化蛋白样品等多种生物样品中的总蛋白浓度。
△酶活性分析:在酶学研究中,作为蛋白含量标准化步骤,用于计算比活性。
△蛋白纯化监控:在蛋白质纯化过程中,快速监测各纯化步骤的蛋白浓度与回收率。
△Western Blot上样:准确定量蛋白样品,确保电泳上样量一致。
四、产品优势
✅快速高效:10-20个样品的检测可在10分钟内完成,显著快于BCA法等传统方法。
✅灵敏度高:最小检测蛋白量可达0.5μg,适用于低浓度蛋白样品。
✅线性优化:试剂盒经特殊优化,在0.1-1.5 mg/ml浓度范围内呈现良好的标准曲线线性。
✅抗干扰性强:对高浓度的β-巯基乙醇(1M)、DTT(5mM)等还原剂具有良好耐受性。
✅操作简便:实验步骤简洁,无需复杂孵育,适合高通量筛选。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 标准品制备:使用与待测样品相同的缓冲液或兼容的稀释液(如PBS),将5 mg/ml BSA蛋白标准品进行系列稀释,制备0-1.5 mg/ml的标准曲线点。
2. 加样:向96孔板中分别加入5μl各浓度标准品及待测蛋白样品。
3. 显色反应:每孔加入250μl G250染色液,室温混匀。
4. 吸光度测定:使用酶标仪在595nm波长下(或560-610nm范围)测定各孔吸光度值。
5. 浓度计算:根据标准曲线计算出待测样品的蛋白浓度。
六、注意事项
1. 标准品处理:蛋白标准品完全溶解并混匀后方可进行稀释,以确保浓度准确性。
2. 试剂温度:G250染色液使用前应恢复至室温,以保持最佳检测灵敏度。
3. 去垢剂干扰:样品中SDS浓度需低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween系列低于0.015%,高浓度去垢剂会干扰测定。
4. 仪器要求:需配备可检测595nm波长的酶标仪及96孔板。
5. 适用范围:本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断、治疗或食品药品领域。
6. 安全防护:实验操作需穿戴实验服及一次性手套。
七、相关产品推荐
1. Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型)(货号:P0006C)
2. 蛋白标准(5mg/ml BSA)(货号:P0007)
3. BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)(货号:P0009)
4. BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号:P0011)