一、基本信息
产品名称:蛋白酶K
产品货号:ST533-0.2ml / ST533-1ml / ST533-5ml
规格:20mg/ml,0.2ml/支,1ml/支,5ml/支
保存温度:-20℃保存
二、产品介绍
本产品为高纯度蛋白酶K溶液,经进口分装,不含DNA酶和RNA酶活性,可直接用于实验。其比活力大于30U/mg,在较宽的pH范围内(pH 4.0-12.5)均具有活性,尤其适用于存在SDS或尿素等变性剂的反应体系,是分子生物学与细胞生物学研究中消化蛋白质的关键工具酶。
三、产品应用
本产品蛋白酶K广泛应用于需要高效去除蛋白质的分子生物学及细胞生物学实验。
△基因组DNA提取:消化细胞或组织裂解液中的蛋白质,释放并纯化基因组DNA。
△RNA提取辅助:在特定方案中用于去除核糖核蛋白复合物及杂蛋白。
△酶消化去除:在核酸纯化后或酶反应前,用于彻底灭活和去除残留的蛋白酶敏感型酶类(如核酸酶)。
△样品预处理:用于免疫染色、原位杂交等实验前的组织或细胞样品蛋白消化。
四、产品优势
✅高纯度:不含DNase和RNase活性,确保核酸样本的完整性,避免降解。
✅宽泛pH适应性:在pH 4.0-12.5范围内有效,兼容多种实验缓冲条件。
✅活性增强:在SDS或尿素存在下酶活性显著提高,特别适用于强变性条件下的蛋白消化。
✅耐受性好:对常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20等去污剂和盐酸胍耐受,应用灵活。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 体系配置:根据实验方案,将样品与含有适当浓度SDS或变性剂的裂解缓冲液混合。
2. 酶添加:向反应体系中加入蛋白酶K至终浓度0.05-1 mg/ml,涡旋混匀。
3. 温育消化:将反应体系置于50-55°C水浴或温育器中孵育,时间通常为30分钟至数小时,或过夜。
4. 酶失活:消化完成后,可通过加热至75°C以上维持10-15分钟以灭活蛋白酶K,或进行后续的酚氯仿抽提等纯化步骤。
六、注意事项
1. 保存条件:本品应始终置于-20℃保存,避免反复冻融,建议分装使用以维持酶活性稳定。
2. 工作浓度:推荐工作浓度为0.05-1 mg/ml,具体需根据缓冲液成分、pH值及反应温度进行优化。
3. 温度控制:最佳反应温度约为65°C,但在此温度下酶自身降解较快,常规实验推荐使用50-55°C以平衡效率与稳定性。
4. 稀释方法:如需稀释原液(20mg/ml),建议使用10mM Tris-HCl (pH 7.4-7.8) 或专用稀释缓冲液,避免使用纯水。
5. 安全规范:本品仅限科研使用。操作时请穿戴实验服与防护手套,遵守实验室生物安全规定。
七、相关产品推荐
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