一、基本信息
产品名称:总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
产品货号:S0101S / S0101M
规格:100次 / 250次
保存温度:-20℃
二、产品介绍
本试剂盒采用基于WST-8的比色法,用于定量检测细胞、组织等生物样品中超氧化物歧化酶的总活性。其原理是通过黄嘌呤氧化酶催化反应生成超氧阴离子,后者与WST-8反应生成水溶性甲臜染料;样品中的SOD可歧化超氧阴离子,从而抑制甲臜染料的生成,SOD活性与吸光度值呈负相关。该方法灵敏度高,检测下限可达0.5 U/mL。
三、产品应用
本总SOD活性检测试剂盒适用于多种生物样本中超氧化物歧化酶活性的定量分析。
△抗氧化研究:评估细胞、组织或体液样本的氧化应激水平与抗氧化能力。
△药物筛选:用于评价药物或化合物对SOD活性的调节作用。
△疾病模型研究:在心血管疾病、神经退行性疾病及衰老等相关模型中检测SOD活性变化。
△植物生理研究:检测植物组织在非生物胁迫下的SOD活性响应。
四、产品优势
✅高灵敏度:采用优化的WST-8法,可检测低至0.5 U/mL的SOD活性。
✅操作简便:试剂预先配制,工作液配制步骤简洁,适合高通量筛选。
✅稳定性好:反应体系稳定,显色产物水溶性佳,检测结果重复性高。
✅广泛适用:兼容细胞裂解液、组织匀浆液、血浆、血清等多种样本类型。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 样品制备:使用试剂盒提供的样品制备液裂解细胞或匀浆组织,离心后取上清,建议用BCA法测定蛋白浓度并适当稀释。
2. 工作液配制:按比例混合检测缓冲液、WST-8和酶溶液,配制成WST-8/酶工作液;将反应启动液(40X)稀释成1X工作液。
3. 加样与孵育:在96孔板中依次加入样品、WST-8/酶工作液及反应启动工作液,混匀后于37℃孵育30分钟。
4. 检测与计算:使用酶标仪在450 nm波长下检测吸光度,根据公式计算样品对超氧阴离子生成的抑制率,进而换算成SOD酶活力单位。
六、注意事项
1. 保存条件:试剂盒需-20℃避光保存,其中WST-8组分对光敏感,应严格避光。未开封试剂有效期为6个月。
2. 样品处理:制备好的样品上清若需保存,建议于-70℃存放,并避免反复冻融以防止酶活性损失。
3. 试剂分装:若试剂盒需多次使用,建议首次使用时将WST-8等关键组份进行分装,以保持试剂稳定性。
4. 标准品一致性:用于绘制标准曲线的标准品稀释液,其基质应与待测样品保持一致,以减少基质效应。
5. 操作环境:建议在冰浴或4℃环境下进行样品制备及工作液配制,以维持酶活性。
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