一、基本信息

产品名称：Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)

产品货号：C0038

规格：500次

保存温度：4°C避光保存，或-20°C避光长期保存

二、产品介绍

Cell Counting Kit-8是一种基于水溶性四唑盐WST-8的细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒。其检测原理依赖于活细胞线粒体内脱氢酶对WST-8的还原作用，生成橙黄色的水溶性甲臜产物，其颜色深度与活细胞数量成正比。该试剂盒操作简便，无需细胞裂解或额外的溶解步骤，具有高灵敏度、宽线性范围和良好的稳定性，适用于高通量筛选。

三、产品应用

本产品广泛应用于基于细胞代谢活性的增殖与毒性分析。

△细胞增殖检测：用于评估细胞因子、生长因子或化合物对细胞生长的促进作用。

△细胞毒性检测：用于测定抗癌药物、化学物质或其他处理因素对细胞的杀伤作用。

△药物筛选：用于高通量筛选影响细胞生长或存活的小分子化合物、天然产物等。

△生长抑制分析：用于评价药物或特定处理对细胞生长的抑制效果。

四、产品优势

✅水溶性：反应生成的甲臜产物水溶性好，无需额外添加有机溶剂进行溶解，简化操作流程。

✅灵敏度：检测灵敏度高，能够准确反映低细胞密度下的代谢活性变化。

✅稳定性：甲臜产物在培养液中稳定性良好，便于进行多时间点检测或批量样品处理。

✅兼容性：检测过程受培养基中酚红及常规浓度血清的影响小，适用性广。

✅便捷性：所有步骤均在原培养孔板内完成，无需洗涤或转移细胞，适合高通量实验。

✅低毒性：CCK-8溶液对细胞基本无毒，孵育后细胞仍可保持活性。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 细胞铺板：根据实验目的（增殖或毒性），将适量细胞悬液接种于96孔板，通常增殖实验每孔接种约2000个细胞，毒性实验每孔接种约5000个细胞，进行预培养并施加实验处理。

2. 试剂添加：每孔加入CCK-8溶液，添加体积通常为培养总体积的10%，例如100微升培养基中加入10微升试剂。

3. 孵育反应：将细胞培养板置于细胞培养箱中继续孵育0.5至4小时，初次实验建议设置不同时间点以确定最佳孵育时长。

4. 吸光检测：使用酶标仪在450 nm波长处测定各孔的吸光度值，若无450 nm滤光片，可使用420-480 nm范围内的滤光片，或采用双波长测定法（测定波长与参考波长大于600 nm）。

六、注意事项

1. 蒸发控制：使用96孔板进行长时间孵育时，应注意边缘孔液体的蒸发，可通过弃用外围孔或于培养箱内水源附近放置来缓解。

2. 干扰物质：检测基于脱氢酶反应，样品中若存在还原性物质（如抗坏血酸、巯基乙醇等）可能干扰结果，需预先去除。

3. 气泡排除：使用酶标仪读数前，需仔细检查并确保孔内液面无气泡，以免影响吸光度测量的准确性。

4. 安全规范：本产品仅限用于科学研究，不可用于临床诊断、治疗、食品或药品。操作时需穿戴实验服与防护手套。

5. 样品处理：经CCK-8孵育后的细胞不建议回收用于其他后续实验，以避免潜在干扰。

6. 信号优化：若最终检测吸光值过低，可通过优化初始接种细胞数或延长CCK-8孵育时间来提高信号强度。

七、相关产品推荐

1. MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（货号：C0009）

2. WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（货号：C0036）

3. Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)（货号：C0037）

4. Enhanced Cell Counting Kit-8 (增强型CCK-8试剂盒)（货号：C0042）