一、基本信息

产品编号：D7283S/D7283M

产品规格：100次/500次

产品描述：本试剂盒提供一种从鼠尾、鼠耳等多种组织样品中快速提取基因组DNA并进行PCR扩增的一体化解决方案，适用于小鼠基因型鉴定。其包含的预混PCR Master Mix简化了操作流程，PCR产物可直接用于电泳分析。

二、产品应用

本产品主要用于小鼠等模式生物的基因型快速鉴定。

△基因型鉴定：从小鼠尾部、耳部等组织快速获取DNA并进行PCR，用于转基因、基因敲除等模型的基因分型。

△DNA快速提取：无需机械研磨、酚氯仿抽提或柱纯化，通过化学消化法在约20分钟内从微量组织中获得PCR级基因组DNA。

△PCR扩增：利用试剂盒内预混的含有染料和Taq DNA聚合酶的Master Mix，对提取的DNA进行特异性扩增。

三、产品优势

✅操作便捷：整合DNA提取与PCR扩增步骤，无需中间纯化，简化实验流程，减少操作时间。

✅快速高效：组织消化与DNA释放过程仅需约20分钟，极大缩短了基因型鉴定前的样品制备周期。

✅灵敏度高：仅需微量组织样品（如0.2-1cm鼠尾尖）即可获得足够用于PCR扩增的模板DNA。

✅防污染设计：预混的PCR Master Mix减少了开盖和移液步骤，有助于降低PCR交叉污染的风险。

✅即用型上样：PCR Master Mix内含上样染料，扩增结束后反应液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。

四、使用说明（实验流程概要）

1. 消化液配制：临用前将DNA Extraction Solution与Enzyme Mix按比例混合，配制组织消化液。

2. 样品处理：取适量组织样品（如鼠尾尖）完全浸没于消化液中，确保样品与液体充分接触。

3. 消化孵育：将样品置于55°C加热块或PCR仪中孵育15分钟，以裂解细胞释放DNA。

4. 酶失活：将样品转移至95°C加热5分钟，以灭活消化酶，防止其抑制后续PCR反应。

5. 终止反应：向消化产物中加入Stop Solution，混匀以稳定体系，所得溶液即可作为PCR模板。

6. PCR体系配制：在冰上融化并混匀预混的Easy-Load™ PCR Master Mix，加入模板、引物及水至所需体积。

7. PCR循环：将反应管置于PCR仪中，设置合适的变性、退火、延伸温度与时间进行扩增。

8. 电泳分析：PCR结束后，取适量反应产物直接上样至琼脂糖凝胶进行电泳，鉴定目标条带。

五、注意事项

1. 样品浸没：消化过程中须确保组织样品完全浸没在消化液液面以下，以保证消化效率。

2. 消化液使用：配制好的消化液应尽快使用，避免酶活性降低影响消化效果。

3. 防污染措施：PCR操作应在洁净区域进行，建议设置无模板阴性对照，以监测是否存在气溶胶或试剂污染。

4. 预混液使用：使用前需将冻存的预混PCR Master Mix完全融化并轻柔混匀，避免产生气泡，尽量减少反复冻融次数。

5. 产物保存：消化并终止反应后的DNA模板可于4°C短期保存或-20°C长期保存。

6. 应用范围：本产品仅限于科研用途，不可用于临床诊断、治疗或食品、药品生产。

六、相关产品推荐

1. Easy-Load™ PCR Master Mix (Green, 2X)（货号：D7255）：含有蓝色和橙色染料的即用型PCR预混液，方便电泳上样与追踪。

2. PCR Kit with BeyoTaq（货号：D7237）：提供高保真BeyoTaq DNA聚合酶及相关缓冲液，适用于对保真度要求较高的PCR扩增。

3. dNTP Mixture (2.5mM each)（货号：D7371）：等摩尔浓度的dNTP混合液，为常规PCR反应提供核苷酸底物。

4. 200微升薄壁PCR管(平盖)（货号：FTUB003）：薄壁设计有利于热传导，适用于各类PCR仪，提升扩增效率。

5. RNase, DNase and DNA Away（货号：R0125）：实验室表面去污染喷雾，可有效清除核酸酶及残留DNA，防止交叉污染。