一、基本信息
产品编号:SN4103(提供 S/M/L 三种规格)
分离方法:阴性磁分选,无需层析柱,仅依赖磁极去除非目标细胞
分离目标:小鼠脾脏来源的 CD8 T 细胞
核心组分:EasyIsoTM Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail、EasyIsoTM Streptavidin Nanobeads
保存条件:4 °C 避光保存,严禁冷冻
运输条件:全程 4 °C 冷链运输
二、产品应用
本产品可在 18–20 min 内获得纯度>90% 的小鼠脾脏 CD8 T 细胞,适用于多种下游实验。
△ 流式检测:分选细胞无需再标记即可直接进行多色流式分析。
△ 体外培养:高活性细胞可立即接种于含 IL-2 的培养体系开展扩增或功能实验。
△ 功能研究:阴性分选保留细胞原始信号状态,适合细胞毒、杀伤及免疫记忆研究。
三、产品优势
✅ 高纯度:阴性策略去除非 CD8 细胞,回收群体纯度稳定>90%,最高可达 99%。
✅ 高活性:抗体与磁珠全程不接触目标细胞,最大限度维持表面受体与功能完整。
✅ 快速:全流程 18–20 min,显著缩短实验周期并降低细胞应激。
✅ 免裂红:脾脏研磨后仅需 70 μm 过滤,无需红细胞裂解,减少处理步骤。
✅ 线性放大:提供 S/M/L 三种规格,试剂用量与细胞量呈线性对应,方便实验放大。
四、使用说明(操作步骤概要)
1. 研磨:70 μm 滤网研磨小鼠脾脏,400 g 离心 5 min 去上清。
2. 重悬:FACS Buffer 调整浓度至1×10⁸ cells/mL(总量<1×10⁷时按 1×10⁷ 计算)。
3. 标记:按 100 μL/1×10⁸ cells 加入 Isolation Cocktail,轻吹混匀。
4. 孵育:室温静置10 min。
5. 加珠:震荡 Nanobeads 5–30 s 后按 100 μL/1×10⁸ cells加入,轻吹混匀。
6. 结合:室温静置 5 min。
7. 稀释:补加 FACS Buffer 至 2.5 mL(5 mL 管)或 7.5 mL(15 mL 管)。
8. 磁分:置于磁极 3 min(单孔)或 5 min(联排)。
9. 收集:倾斜磁极,将上清倒入新管,400 g 离心 10 min 获得 CD8 T 细胞。
五、注意事项
1. 防冰:试剂严禁零度以下冻存,防止磁珠聚集及抗体失活。
2. 无菌:全程在生物安全柜中操作,避免细菌或真菌污染。
3. 缓冲:自配缓冲液需确认低内毒素且渗透压 280–300 mOsm/kg。
4. 即用:分选后细胞建议 2 h 内使用,长时间放置需放 4 °C 并添加 2% FBS。
5. 磁极:确保磁极磁场强度稳定,过老或消磁设备会降低分选效率。
六、相关产品推荐
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