一、基本信息  

产品编号：SN3401（提供 S/M/L 三种规格）  

分离方法：阴性选择无柱磁分选  

分离目标：人外周血单核细胞（PBMC 中的 CD14⁺ 单核细胞）  

核心组分：EasyIsoTM Human FcR Blocker、EasyIsoTM Human Monocyte Isolation Cocktail、EasyIsoTM Streptavidin Nanobeads  

保存条件：4 °C 避光保存，禁止冷冻  

运输条件：低温冰袋运输，保持 4 °C  

二、产品应用  

本试剂盒可在 18–20 min 内从人 PBMC 中获得高活性单核细胞，满足多场景下游实验需求。  

△ 流式检测：分选后细胞可直接用于 CD11b/CD14 等多色流式分析，背景干净。  

△ 体外培养：所得单核细胞可在无血清或含血清培养基中维持高存活率，支持巨噬细胞或 DC 诱导分化。  

△ 功能实验：适用于吞噬、迁移、细胞因子分泌等体外功能研究，保留原始生物学特性。  

△ 分子研究：提取的 RNA、蛋白质量高，满足 qPCR、Western blot、单细胞组学等下游应用。  

三、产品优势  

✅ 高纯度：阴性选择策略使 CD14⁺ 单核细胞纯度稳定 ≥85%，最高可达 95%。  

✅ 高活性：抗体-磁珠全程不接触目标细胞，减少激活与损伤，存活率 >95%。  

✅ 快速：完整流程 18–20 min，显著缩短实验周期。  

✅ 无柱设计：免去色谱柱堵塞与清洗步骤，降低样本损失与污染风险。  

✅ 规格灵活：S/M/L 三种包装，覆盖 1×10⁷–1×10⁹ 细胞处理量，适配常规磁极。  

四、使用说明（操作步骤概要）  

1. PBMC制备：密度梯度离心获取 PBMC，400 g、5 min 离心后计数。  

2. 缓冲液重悬：用预冷 FACS Buffer 调整细胞浓度至 1×10⁸ cells/mL。  

3. FcR封闭：按 100 µL/mL 加入 EasyIsoTM Human FcR Blocker，轻混。  

4. 抗体标记：加入同等体积 Monocyte Isolation Cocktail，4 °C 孵育 15 min。  

5. 清洗：10 倍体积预冷缓冲液离心去上清，重悬恢复初始浓度。  

6. 磁珠结合：混匀 Streptavidin Nanobeads 后按 100 µL/mL 加入，4 °C 孵育 15 min 并间歇轻混。  

7. 稀释装管：补加预冷缓冲液至对应磁极推荐体积（2.5 mL/7.5 mL/更大体积）。  

8. 磁极分选：置入磁极静置 3–5 min，倾斜倒出含单核细胞的阴性组分。  

9. 离心收集：400 g、10 min 离心获得高纯度单核细胞沉淀，按需重悬备用。  

五、注意事项  

1. 防冻结：所有组分 4 °C 保存，严禁冷冻，以防磁珠聚集失效。  

2. 无菌操作：全程在生物安全柜中完成，避免细菌或真菌污染。  

3. 缓冲液预冷：FACS Buffer 需提前 4 °C 预冷，减少细胞应激与非特异吸附。  

4. 密度优先：推荐使用淋巴细胞分离液获取 PBMC，避免红细胞裂解液带来的细胞应激。  

5. 磁极匹配：按处理量选择对应规格磁极（5 mL 单孔/15 mL 联排/50 mL 单孔），确保分选效率。  

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