一、基本信息
产品编号:SN3102(提供S/M/L 三种规格)
分离方法:阴性选择无柱磁分离
分离目标:人外周血单个核细胞(PBMC)中的CD4⁺ T细胞
核心组分:EasyIsoTM Human CD4 T cell Isolation Cocktail、EasyIsoTM Streptavidin Nanobeads
保存条件:4 °C,禁止冷冻
运输条件:4 °C冷链
二、产品应用
本产品可在18–20 min内获得高纯度CD4⁺ T细胞,直接用于下游实验。
△ 流式检测:提供>90 %纯度细胞,满足多色 panel 精准设门需求。
△ 体外培养:低干扰抗体残留,支持长期活化与扩增实验。
△ 功能研究:细胞原始状态保留良好,适用于增殖、细胞因子分泌及信号通路分析。
三、产品优势
✅ 阴性策略:仅标记非目标细胞,避免CD4⁺ T细胞受体被抗体交联激活。
✅ 无柱设计:磁极直接吸附,省去色谱柱冲洗步骤,缩短操作时间。
✅ 纳米磁珠:链霉亲和素-生物素高亲和力结合,非特异吸附低,得率稳定。
✅ 快速流程:全程18–20 min,减少细胞体外静置带来的活性下降。
四、使用说明(操作步骤概要)
1. PBMC制备:密度梯度离心获取PBMC,400 g×5 min洗涤并计数。
2. 重悬:用FACS buffer调整细胞密度≤1×10⁸ cells/mL。
3. 标记:按100 μL/mL加入Isolation Cocktail,轻柔混匀后室温孵育10 min。
4. 磁珠结合:同体积Streptavidin Nanobeads混匀,室温静置5 min。
5. 稀释:补加FACS buffer至2.5 mL(5 mL管)或7.5 mL(15 mL管)。
6. 磁分离:置于对应磁极3–5 min,倾斜后将悬液倒入新管,收获CD4⁺ T细胞。
五、注意事项
1. 防冷冻:试剂及细胞全程4 °C,禁止冻存,以防磁珠聚集与抗体失活。
2. 无菌操作:PBMC与缓冲液需无菌,降低培养阶段污染风险。
3. 细胞下限:每次实验PBMC总量≥1×10⁷ cells,低于此值按1×10⁷计算用量。
4. 缓冲液质量:自行配制FACS buffer需确认渗透压290–300 mOsm/kg且内毒素<0.5 EU/mL。
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