一、基本信息

产品名称：Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒

产品货号：E-CK-A217

规格：20次检测/50次检测/100次检测/200次检测

保存温度：2-8℃避光保存

二、产品介绍

本试剂盒基于磷脂酰丝氨酸外翻原理，通过异硫氰酸荧光素标记的重组人Annexin V与碘化丙啶（PI）联合染色，实现对细胞凋亡的流式细胞术定量分析。适用于检测悬浮及贴壁细胞的早期与晚期凋亡，可有效区分活细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

三、产品应用

Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒主要用于细胞凋亡的定性与定量分析。

△药物筛选：评估化合物或药物处理对细胞凋亡的诱导或抑制效应。

△机制研究：探究特定基因、信号通路或环境因素对细胞凋亡进程的影响。

△肿瘤生物学：研究肿瘤细胞的凋亡抗性或化疗敏感性。

△免疫学：分析免疫细胞的激活诱导凋亡或免疫耐受。

四、产品优势

✅高灵敏度：APC标记的Annexin V对凋亡细胞表面外翻的磷脂酰丝氨酸具有高亲和力，确保早期凋亡细胞的准确识别。

✅清晰分群：PI染色与Annexin V-APC双参数分析，可在流式散点图上清晰区分活细胞、早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞。

✅操作灵活：提供一步法和两步法两种染色方案，可根据实验需求及样本特性选择，两步法在保证效果的同时可节约试剂用量。

✅兼容性强：适用于多种细胞类型，包括悬浮细胞和贴壁细胞，检测结果稳定可靠。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 样本准备：诱导细胞凋亡后，收集细胞，用PBS洗涤并计数。

2. 细胞重悬：取适量细胞，离心弃上清，用1×Annexin V结合缓冲液重悬。

3. 染色孵育：向细胞悬液中加入Annexin V-APC试剂和PI试剂，轻柔混匀后室温避光孵育15-20分钟。

4. 缓冲液稀释（两步法）：若采用两步法，孵育后需补加1×Annexin V结合缓冲液。

5. 上机检测：孵育完成后，应尽快使用流式细胞仪进行检测，建议在1小时内完成。

六、注意事项

1. 适用范围：本产品仅限于科学研究用途。

2. 样本处理：检测贴壁细胞时，需合并收集培养上清中的悬浮细胞与消化后的贴壁细胞，以确保数据完整性。

3. 消化影响：应轻柔处理贴壁细胞，避免机械损伤。推荐使用不含EDTA的胰酶进行消化，以防干扰Annexin V与靶点的结合。

4. 试剂干扰：若使用含EDTA的消化液，后续需充分洗涤细胞以彻底去除EDTA。

5. 检测时效：染色后的样本需及时检测，延迟检测可能导致凋亡或坏死细胞比例发生变化。

6. 荧光保护：所有操作步骤需注意避光，以减缓荧光染料的淬灭。

7. 个人防护：实验操作过程中请佩戴一次性手套并穿着实验服。

七、相关产品推荐

1. Annexin V-APC Reagent（货号：E-CK-A117）

2. Annexin V Binding Buffer (10×)（货号：E-CK-A151）

3. PI Reagent (50μg/mL)（货号：E-CK-A161）