一、基本信息

产品名称：NETosis比色法检测试剂盒

产品货号：E-BC-K884-M

产品规格：48T (32 samples)/96T (80 samples)

保存温度：-20°C避光或按各组分特定要求保存

二、产品介绍

本试剂盒是一种基于比色法的体外研究用试剂盒，专用于定量检测细胞样本中中性粒细胞发生NETosis的程度。其原理是通过检测中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的活性，该酶是NETosis过程中的关键效应蛋白，从而间接反映NETs的形成水平。试剂盒包含标准品、特异性底物及反应体系所需组分，操作简便，适用于酶标仪检测。

三、产品应用

本NETosis比色法检测试剂盒主要用于以下研究领域：

△中性粒细胞功能研究：评估中性粒细胞在免疫应答中形成中性粒细胞胞外陷阱的能力。

△炎症机制研究：探究感染、自身免疫等病理过程中NETosis的激活程度与调控机制。

△药物筛选与药理学研究：评价药物或化合物对NETosis过程的抑制或促进作用。

四、产品优势

✅特异性：通过检测中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的活性，特异性反映NETosis过程，而非其他细胞死亡方式。

✅灵敏度：检测下限低至0.31 U/L，能够有效检测低水平的NETosis发生。

✅线性范围：在0.31-18.33 U/L范围内具有良好的线性关系，确保定量准确。

✅操作便捷：提供预混标准品及优化的工作液配方，简化实验流程，减少操作误差。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：将所有试剂平衡至室温，并按照说明书精确配制分析缓冲液、诱导剂工作液、底物工作液及标准品稀释液。

2. 样本诱导：使用分析缓冲液重悬中性粒细胞至指定密度，加入PMA或A23187工作液于37°C诱导NETosis发生4-6小时。

3. 样本处理：弃去诱导上清，清洗细胞后，加入清除剂工作液孵育，随后进行终止、离心，收集上清作为待测样本。

4. 加样与孵育：将标准品与待测样本分别加入酶标板孔中，随后加入底物工作液，振板混匀后于37°C避光孵育30分钟。

5. 检测读数：使用酶标仪在380 nm波长下检测各孔的吸光度值。

6. 数据分析：根据标准曲线计算样本中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的酶活性，结果以每百万细胞单位数表示。

六、注意事项

1. 用途限定：本产品仅限于体外科学研究使用，不可用于临床诊断、治疗或其他用途。

2. 样本要求：待测细胞应为中性粒细胞，且细胞活力和密度需符合要求，否则可能影响检测结果。

3. 试剂保存：各组分需严格按照指定温度（-20°C避光）保存，不同批号试剂请勿混用，使用前请离心微量试剂。

4. 操作规范：实验需在无菌环境下进行，所有工作液应现用现配或按指示短期保存，避免反复冻融。

5. 仪器校准：使用前请校准酶标仪，确保在360-400 nm（推荐380 nm）波长下读数准确。

6. 数据解读：样本中NE活性若超出检测范围，需对样本进行适当稀释后重新测定。

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