一、基本信息

产品名称：胞内因子固定破膜剂

产品货号：E-CK-A109

规格：50 Assays/100 Assays/500 Assays

保存温度：2~8°C

二、产品介绍

Elabscience® 细胞内固定/破膜缓冲液试剂盒是一款经过优化的试剂组合，专门用于流式细胞术检测中针对细胞因子、趋化因子等细胞内蛋白抗原的染色实验。该试剂盒通过高效的固定与温和的破膜步骤，在维持细胞形态的同时，确保抗体能够有效进入胞内与靶标结合。

三、产品应用

本细胞内固定/破膜缓冲液试剂盒主要用于流式细胞术分析中的细胞内抗原染色。

△细胞因子检测：用于检测细胞内表达的细胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL-2等。

△趋化因子检测：用于分析细胞内趋化因子的表达与分布。

△磷酸化蛋白分析：适用于检测信号通路中关键蛋白的磷酸化状态。

△转录因子染色：用于流式细胞术检测核内转录因子的表达。

四、产品优势

✅优化配方：经过优化的固定与破膜体系，能在有效暴露细胞内抗原的同时，较好地维持细胞结构。

✅广泛兼容：可与大多数商业化的流式检测抗体兼容，适用于多种细胞内靶标的研究。

✅操作稳定：试剂性能稳定，重复性好，有助于获得可靠且一致的实验结果。

✅灵活应用：提供不同规格选择，并包含可选步骤，可根据具体实验设计进行流程调整。

五、使用说明（实验流程概要）

1. 样本制备：取约1×10^6个细胞置于流式管中，体积约为100μL。

2. 表面染色：根据抗体说明书，使用荧光标记抗体对细胞表面标志物进行染色。

3. 清洗离心：加入含1% BSA的PBS或专用染色缓冲液重悬细胞，300×g离心5分钟后弃上清。

4. 细胞固定：用200μL缓冲液重悬细胞，加入200μL固定缓冲液，室温避光孵育30-60分钟。

5. 破膜清洗：加入1mL 1×破膜工作液，600×g离心5分钟以去除固定液。

6. 胞内染色：用100μL 1×破膜工作液重悬细胞，加入胞内染色抗体，室温避光孵育30分钟。

7. 最终清洗：加入2mL含1% BSA的PBS或染色缓冲液，600×g离心5分钟，弃上清。

8. 上机分析：用适量缓冲液重悬细胞，即可进行流式细胞仪检测。

六、注意事项

1. 使用范围：本品仅供科学研究使用，不用于临床诊断。

2. 沉淀处理：浓缩破膜缓冲液可能出现沉淀，属正常现象，使用前混匀即可，不影响效果。

3. 样本前处理：对于含红细胞的样本，需在使用本试剂盒前完成红细胞裂解步骤。

4. 背景控制：固定破膜过程可能改变细胞光散射特性并增加背景，建议在缓冲液中添加BSA或FBS，并使用死活细胞染料以排除死细胞干扰。

5. 条件优化：部分抗原表位对固定敏感，建议根据靶标特性对固定时间等条件进行预实验优化。

6. 实验安全：操作时请穿戴实验服及一次性手套，遵守实验室安全规范。

7. 特殊固定：若细胞表面标志耐固定且需延迟检测，可将细胞悬液与固定液按3:1比例混合，于4°C固定过夜。

七、相关产品推荐

1. 流式细胞染色缓冲液（货号：E-CK-A107）

2. Foxp3/转录因子染色固定&破膜试剂盒（货号：E-CK-A108）

3. Purified Anti-Mouse CD16/32 Antibody（货号：E-AB-F0997A ）

4. 10×红细胞裂解液(含固定剂)（货号：E-CK-A106）