一、基本信息

产品名称：细胞外酸化率(ECAR)荧光法测试盒

产品货号：E-BC-F069

产品规格：48T/96T

保存温度：-20°C避光保存

二、产品介绍

本产品是一种基于荧光探针法的细胞外酸化率(ECAR)检测试剂盒，适用于体外定量分析细胞样本的糖酵解活性。试剂盒采用特异性pH敏感探针，通过监测细胞外环境酸化引起的荧光强度变化，实时反映细胞无氧呼吸代谢水平，为细胞代谢功能研究提供可靠工具。

三、产品应用

本细胞外酸化率(ECAR)荧光法测试盒主要用于细胞代谢研究，具体应用包括：

△糖酵解活性评估：检测细胞在正常或应激状态下的无氧代谢水平

△药物筛选与机制研究：评估代谢调节类药物或化合物对细胞糖酵解途径的影响

△肿瘤细胞代谢研究：分析肿瘤细胞的瓦博格效应及代谢重编程

△干细胞与发育生物学：研究细胞分化过程中的能量代谢转换

△免疫细胞功能研究：评估免疫细胞活化过程中的代谢变化

四、产品优势

✅灵敏度高：采用特异性荧光探针，对细胞外pH微小变化响应灵敏，检测下限低

✅操作简便：试剂盒提供预混盐溶液和探针，工作液配制步骤简单，实验流程标准化

✅兼容性好：适用于贴壁细胞与悬浮细胞两种实验体系，满足不同研究需求

✅数据可靠：检测过程中通过设置空白对照，有效扣除背景干扰，确保结果准确性

✅实时监测：支持在荧光酶标仪上进行长时间动态监测，获得完整的ECAR变化曲线

五、使用说明（实验流程概要）

1. 试剂准备：将试剂盒组分平衡至室温，使用DMSO配制探针储备液，再与盐溶液按比例混合制备探针工作液

2. 细胞准备：根据实验设计进行细胞培养与药物处理，对贴壁细胞需提前接种至黑色透底培养板过夜贴壁

3. 加样孵育：弃去细胞培养上清，向实验孔与空白对照孔中加入预热至37°C的探针工作液

4. 荧光检测：立即将培养板置于预热至37°C的荧光酶标仪中，在激发波长490 nm/发射波长535 nm条件下进行检测

5. 数据采集：每间隔2-3分钟读取一次荧光值，持续监测100-120分钟，记录荧光强度随时间变化曲线

6. 结果计算：选取荧光值变化的线性阶段，根据公式ECAR = ∆F/∆T计算细胞外酸化率

六、注意事项

1. 储存条件：试剂二（探针）需严格避光保存于-20°C，配制好的工作液应现配现用

2. 温度控制：检测前需将试剂工作液与荧光酶标仪提前预热至37°C，确保检测体系温度恒定

3. 细胞数量：ECAR检测信号与细胞数量相关，建议通过预实验优化接种细胞密度

4. 环境控制：加入探针工作液后，应避免使用CO₂培养箱孵育，防止环境CO₂干扰检测结果

5. 药物处理：若药物处理时间超过1小时，建议在细胞接种前完成处理，避免影响检测窗口期

6. 探针浓度：可根据预实验结果适当调整探针工作液中的探针浓度，以获得最佳信号响应

七、相关产品推荐

1. 氧消耗率（OCR）荧光法测试盒（增强型）（货号：E-BC-F070）

2. ATP含量比色法测试盒（酶法）（货号：E-BC-K774-M）

3. L-乳酸（LA）比色法测试盒（货号：E-BC-K044-M）

4. 葡萄糖（Glu）比色法测试盒（GOD-POD法）（货号：E-BC-K234-M）

5. 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)（货号：E-CK-A301）