一、基本信息
产品名称:线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
产品货号:E-CK-A301
规格:20 Assays,50 Assays,100 Assays
保存温度:JC-1 Assay Buffer (10×) 保存于 2-8°C;JC-1 (500×) 与 10 mM CCCP 保存于 -20°C,需避光。
二、产品介绍
本试剂盒以JC-1为荧光探针,用于快速、灵敏地检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)的变化。线粒体膜电位下降是细胞早期凋亡的关键标志性事件。试剂盒包含必要的染色缓冲液,并提供羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)作为诱导膜电位下降的阳性对照试剂,适用于细胞、组织或纯化线粒体样本的检测。
三、产品应用
Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (with JC-1) 主要用于基于线粒体膜电位变化的细胞功能研究,具体应用包括:
△细胞凋亡早期检测:通过JC-1荧光颜色从红到绿的转变,灵敏指示线粒体膜电位下降。
△线粒体功能评估:用于评估药物、毒素或病理条件下线粒体的健康状态与功能完整性。
△细胞应激反应研究:监测各种细胞应激源(如氧化应激、营养剥夺)对线粒体膜电位的即时影响。
△药物筛选与毒性测试:作为评估化合物对线粒体功能潜在影响的工具。
四、产品优势
✅灵敏度高:JC-1探针对线粒体膜电位变化响应灵敏,可检测凋亡早期事件。
✅双色指示:通过红/绿荧光比例的变化定量反映膜电位水平,结果直观可靠。
✅操作便捷:试剂盒提供即用型组分与优化缓冲体系,实验流程标准化。
✅包含对照:提供CCCP作为阳性对照,便于实验条件的优化与结果验证。
五、使用说明(实验流程概要)
1. 试剂配制:用超纯水将JC-1 Assay Buffer (10×)稀释10倍,配制成1×工作缓冲液。将JC-1 (500×)与1×缓冲液按比例混合,配制JC-1染色工作液。
2. 样本处理:对于待测样本,直接进行染色。对于阳性对照样本,需先用10 μM CCCP预处理细胞20分钟。
3. 细胞染色:弃去细胞培养液,加入适量JC-1工作液,37°C避光孵育20分钟。
4. 清洗细胞:孵育结束后,用预温的1× JC-1 Assay Buffer清洗细胞一次,以去除未进入细胞的探针。
5. 重悬/观察:用适量缓冲液重悬细胞(悬浮细胞)或加入新鲜缓冲液/培养液(贴壁细胞),立即进行检测。
6. 检测分析:使用流式细胞仪进行定量分析,或使用荧光显微镜/激光共聚焦显微镜进行形态学观察。
六、注意事项
1. 用途限定:本产品仅用于科学研究,不可用于临床诊断。
2. 安全操作:阳性对照试剂CCCP对人体有害,操作时需穿戴适当的个人防护装备,并在通风良好的环境下进行。
3. 试剂保存:各组分需按指定温度保存,JC-1与CCCP需避光并避免反复冻融,配制好的1×缓冲液建议一周内使用。
4. 试剂溶解:JC-1母液在低温下可能产生沉淀,使用前应在20-25°C水浴中完全溶解并混匀。
5. 荧光淬灭:JC-1为光敏染料,实验操作及保存过程中需注意避光,检测时尽量缩短曝光时间。
6. 离心参数:离心细胞时,建议使用缓升缓降模式(如Acc≤3,Dec≤2),以减少细胞机械损伤和损失。
七、相关产品推荐
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