一、基本信息
产品编号:E-EL-0083
检测方法:竞争法酶联免疫吸附测定
检测物种:通用
规格:96T / 48T / 96T × 5
灵敏度:0.47 pmol/mL
检测范围:0.78-50 pmol/mL
样本类型:血清、血浆或其他生物体液
样本体积:50 μL
总检测时间:2小时30分钟
储存条件:2-8℃
有效期:12个月
二、产品应用
△心血管研究:用于检测心肌细胞、血管内皮细胞及平滑肌细胞中cGMP水平,以研究一氧化氮信号通路、血管舒张功能及药物作用机制。
△神经科学研究:用于定量分析脑组织、脑脊液或神经细胞中cGMP含量,以探究神经递质信号转导、突触可塑性及神经退行性疾病相关机制。
△药物筛选与开发:用于评估候选药物对鸟苷酸环化酶(GC)活性或磷酸二酯酶(PDE)抑制活性的影响,为心血管及神经类药物开发提供药效学数据。
△细胞信号通路研究:用于监测细胞在受到特定刺激(如一氧化氮、利钠肽等)后,胞内第二信使cGMP的动态变化,解析相关信号转导过程。
三、产品优势
✅高灵敏度:最低检测限可达0.47 pmol/mL,能够精准检测生物样本中低丰度的cGMP。
✅优异特异性:采用高特异性单克隆抗体,与环磷酸腺苷(cAMP)及其他结构类似物无明显交叉反应,确保检测结果准确可靠。
✅操作便捷:采用预包被板及优化的试剂配方,总检测时间约为2.5小时,流程简化,适合批量样本检测。
✅良好的精密度与准确度:板内与板间变异系数均小于10%,样本回收率在80%-120%之间,保证了实验结果的重复性与可靠性。
✅宽泛的样本兼容性:适用于多种生物体液样本,包括血清、血浆等,应用范围广泛。
四、检测原理(使用说明概要)
1. 加样与竞争孵育:向预包被cGMP抗原的微孔板中加入标准品或待测样本,同时加入生物素标记的抗cGMP单克隆抗体,样本中的游离cGMP与板上的包被抗原竞争结合抗体。
2. 洗涤:洗去孔内未结合的游离成分。
3. 酶标记物孵育:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,与结合在板上的生物素化抗体特异性结合。
4. 洗涤:再次洗涤,彻底去除未结合的酶标记物。
5. 显色反应:加入显色底物TMB,在HRP催化下产生蓝色产物。
6. 终止与检测:加入终止液使反应停止,溶液颜色由蓝变黄,使用酶标仪在450 nm波长下测定各孔的吸光度(OD值)。
7. 结果计算:根据标准品的浓度与对应的OD值绘制标准曲线,通过曲线方程计算待测样本中cGMP的浓度。
五、注意事项
1. 试剂保存:所有组分需于2-8℃保存,避免反复冻融或长时间置于室温,使用前请平衡至室温。
2. 样本处理:血清、血浆样本建议使用EDTA或肝素作为抗凝剂,避免溶血,并尽快分离检测,如需保存,应分装冻存于-20℃或更低温度。
3. 标准曲线:每次实验必须同时运行标准曲线,且建议设置复孔,以确保结果计算的准确性。
4. 加样与混匀:加样时请使用精确的移液器,避免产生气泡。孵育前需轻轻晃动微孔板以确保充分混匀。
5. 洗涤步骤:洗涤是实验的关键步骤,必须确保每孔加满洗涤液并彻底弃净,以避免背景升高或非特异性结合。
6. 显色控制:显色反应需避光进行,并密切观察显色情况,待高浓度标准品孔出现明显颜色梯度且低浓度孔显色较浅时即可终止。
7. 仪器校准:使用酶标仪前应确保其性能良好,建议使用双波长检测(450 nm作为主波长,630 nm或570 nm作为参考波长)以校正孔板底部划痕或指纹等造成的干扰。
六、相关产品推荐
1. cAMP(Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit(E-EL-0056)
2. Human NOS2/iNOS(Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit(E-EL-H0753)
3. 即用型终止液(E-ELIR-006)
4. 单组份TMB显色液(E-IR-R201)
5. 通用型样品稀释液(E-ELIR-011)