一、基本信息  

产品编号：E-EL-0015  

检测方法：竞争法酶联免疫吸附测定（Competitive-ELISA）  

检测物种：通用（Universal）  

规格：96孔、48孔、96孔×5可选  

灵敏度：1.88 ng/mL  

检测范围：3.13–200 ng/mL  

样本类型：血清、血浆及其他生物体液  

样本体积：50 μL/孔  

总检测时间：2小时30分钟  

储存条件：2–8 °C避光密封保存  

有效期：12个月  

二、产品应用  

△ 营养评估：定量监测人或动物体内25-HVD3储备，辅助判断维生素D营养状况。  

△ 骨代谢研究：关联血清25-HVD3水平与骨转换指标，解析钙磷稳态调控机制。

△ 慢病机制：探索慢性肾病、糖尿病等低维生素D状态下25-HVD3变化与病理进程关系。 

△ 药物开发：评价维生素D补充剂或纳米递送系统对25-HVD3生物利用度的提升效果。  

△ 动物模型：在大小鼠、猪、猴等模型中动态追踪干预前后25-HVD3浓度变化。 

三、产品优势  

✅ 高灵敏：检测下限1.88 ng/mL，可准确区分不足与充足临界值。  

✅ 宽线性：3.13–200 ng/mL单条标准曲线覆盖缺乏、不足、充足及过量区间。  

✅ 通用性：对人与常见实验动物无种属差异，跨研究平台数据可比性强。  

✅ 高特异：单克隆抗体识别25-HVD3，与1,25-(OH)₂D₃、24,25-(OH)₂D₃等交叉＜1%。  

✅ 精密稳定：板内/板间CV＜10%，回收率80–120%，12个月批间差异可控。  

四、检测原理（使用说明概要）  

1. 加样：将50 μL标准品或样本加入预包被25-HVD3抗原的微孔。  

2. 竞争：加入生物素标记抗25-HVD3单抗，37 °C孵育1 h，形成抗原-抗体复合物。  

3. 信号：加入HRP-亲和素，37 °C孵育30 min，与生物素高亲和力结合。  

4. 显色：TMB底物室温反应10 min，终止液终止，450 nm读取吸光度。 

5. 计算：以四参数Logistic拟合标准曲线，反算样本中25-HVD3浓度。  

五、注意事项  

1. 防污染：不同浓度标准品与样本需更换枪头，避免交叉携带。  

2. 避光：TMB底物对光敏感，显色过程需避光并严格控制10 min时限。  

3. 稀释规范：血清或血浆需用配套稀释液，禁止以纯水或PBS直接稀释。  

4. 温度稳定：孵育阶段确保37 °C恒定，温度波动>2 °C将影响竞争平衡。  

5. 曲线判定：标准曲线相关系数R²≥0.990方可用于样本计算，否则需重做。  

六、相关产品推荐  

1. FA/VB9(Folic Acid/Vitamin B9) ELISA Kit（E-EL-0009）  

2. VA(Vitamin A) ELISA Kit（E-EL-0135）  

3. Mouse PCT(Procalcitonin) ELISA Kit（E-EL-M2419）  

4. Human I-PTH(intact Parathormone) ELISA Kit（E-EL-H6076）  

5. 通用型样品稀释液（E-ELIR-011）