一、基本信息
产品编号:E-EL-M0047
检测方法:双抗体夹心ELISA,比色法
检测物种:小鼠(Mus musculus)
规格:96 孔板/48 孔板/96 孔板×5
灵敏度:9.38 pg/mL
检测范围:15.63–1000 pg/mL
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆及其他体液
样本体积:100 μL/孔
总检测时间:3 h 30 min(含孵育与显色)
储存条件:2–8 °C,避光防潮
有效期:12 个月
二、产品应用
△ 炎症评估:定量监测实验小鼠急、慢性炎症模型中IL-17A动态变化。
△ 免疫分型:辅助鉴定Th17细胞活性及Th17介导的免疫应答强度。
△ 药效验证:评价靶向IL-17/Th17通路候选药物在体内的抑制效力。
△ 疾病机制:解析自身免疫性疾病、感染及肿瘤微环境中IL-17A的表达调控。
三、产品优势
✅ 高灵敏:检测低限达 9.38 pg/mL,可准确捕捉低丰度 IL-17A。
✅ 高特异:抗体经亲和层析纯化,与小鼠 IL-17F、IL-22 等同家族因子交叉反应 <0.1%。
✅ 宽线性:15.63–1000 pg/mL 范围内线性相关系数 r≥0.999,无需额外稀释即可覆盖生理与病理浓度。
✅ 高精密:板内与板间变异系数均 <10%,保证批次间数据一致性。
✅ 高回收:添加回收率 80–120%,符合生物样本定量分析国际指南要求。
✅ 一站式:预包被可拆微孔板、标准品、检测抗体、HRP-亲和素及显色底物全套配套,实验仅需 3.5 h。
四、检测原理(使用说明概要)
1.包被:预包被抗小鼠IL-17A单克隆抗体微孔板,4 °C过夜平衡备用。
2.结合:加入标准品或100 μL样本,37 °C孵育90 min,使IL-17A与固相抗体结合。
3.检测:依次加入生物素化检测抗体与HRP-链霉亲和素,形成四级夹心复合物。
4.显色:TMB底物室温避光反应15 min,HRP催化生成蓝色产物。
5.终止:加入终止液终止反应,450 nm(参考630 nm)读取吸光度。
6.计算:四参数Logistic拟合标准曲线,自动回算样本IL-17A浓度。
五、注意事项
1. 复溶:标准品溶解后需静置 10 min 并轻轻颠倒,确保完全混匀。
2. 稀释:高值样本需用样本稀释液进行 1:2–1:10 预稀释,避免 Hook 效应。
3. 避光:TMB 底物对光敏感,显色过程需避光并在 15 min 内完成读数。
4. 温控:孵育步骤须严格置于 37 °C 恒温箱,温度波动 ±1 °C 内以保证重复性。
5. 洗板:手工洗板需保证每孔注满洗涤液并静置 30 s,机洗应选择 350 μL/孔 5 次程序,降低背景。
6. 终止:加终止液后 3–5 min 内立即测定 450 nm 吸光度,延迟读数将导致信号衰减。
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